[發明專利]分泌型IgA抗子宮內膜抗體檢測試劑盒及使用方法

無效

• 申請號: 201310102069.0
• 申請日: 2013-03-28
• 公開（公告）號: CN103197057A
• 公開（公告）日: 2013-07-10
• 發明（設計）人: 李立和;王彥平;李錚
• 申請（專利權）人: 天津市寶坻區人民醫院
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543;G01N33/531
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

一種分泌型IgA抗子宮內膜抗體酶免檢測試劑盒及其檢測方法，屬于酶免疫分析技術領域。

背景技術

不孕不育，分為不孕癥和不育癥，根據發生的原因可分為器質性、免疫性、醫源性、感染性、生理性不孕，根據是否有過妊娠史可分為原發性不孕和繼發性不孕。還有10％～20％的患者原因不明，在此類患者中，免疫因素占據30～40％起著不可忽視的作用。因此免疫性不孕的臨床診治越來越被人們重視，它將有助于臨床的診斷與治療，為患者帶來福音。抗子宮內膜抗體(AEAb)主要有IgG、IgM、IgA3種類型，受孕是一個很復雜的生理生殖過程，需要機體生殖器官、內分泌、免疫系統功能正常，協調一致才能完成。正常位置的子宮內膜對機體無抗原性，但女性生殖道感染使其內部環境發生改變、生理屏障受到破壞、女性體內獨特型抗體和抗獨特型抗體的網絡功能紊亂，同時也可使免疫系統受損及損傷子宮內膜，導致機體將自身內膜組織作為抗原刺激機體產生抗子宮內膜抗體，以及異位的子宮內膜也可作為抗原刺激機體免疫系統，產生特異性的抗子宮內膜抗體，可以和子宮內膜中的抗原結合，發生抗原抗體反應，激活補體系統，發生一系列免疫反應，導致營養胚胎的糖原分泌不足，同時，抗子宮內膜抗體往往與子宮內膜異位癥并存，可通過抑制排卵、干擾精子和卵子的運送、阻礙精卵結合、影響早期胚胎的發育、干擾胚胎著床等環節，最終導致孕卵著床失敗而致患者不孕不育。由于反復刺激而大量產生達到一定含量時，可與自身靶細胞一子宮內膜組織發生抗原抗體結合反應，并激活補體引起損傷性效應，造成子宮內膜組織細胞生化代謝及生理功能損害，從而引起不孕。抗子宮內膜抗體是一種自身抗體，所針對的抗原為子宮內膜腺上皮細胞中的一種孕激素依賴蛋白，正常位置的子宮內膜對機體無抗原性，但異位的子宮內膜可作為抗原刺激機體免疫系統，產生特異抗子宮內膜抗體不僅和異位子宮內膜發生抗原抗體反應，同時也可與正常位置的子宮膜細胞中的抗原位點相結合，激活補體系統，局部產生免疫病理變化，直接影響子宮內膜腺體的功能，從而導致孕卵著床失敗或(和)不育，最終以不顯性的早期流產而告終。因此抗子宮內膜抗體檢測對臨床診斷與治療不孕不育患者也有重要意義。

分泌型IgA抗體(SIgA抗體)可分為血清型和分泌型，血清型多為IgA單體，分泌型多為IgA二聚體和多聚體，IgA可以單體、二聚體甚至多聚體的形式存在，聚合體不僅結合抗原的能力增強，還可使IgA能結合分泌片，賦于IgA以特殊的活性。

局部免疫SIgA是由J鏈連接成的雙聚IgA與SC(分泌片段)結合后形成的復合物，多為二聚體或多聚體而不易檢測。SIgA與IgA在免疫功能上具有不同之處，作用的最大特點是將抗原抗體的反應控制在膜免疫系統的局部，而且是以非炎癥的方式限制抗原物質對粘膜表面的侵入。SIgA的重鏈有一個含額外半胱氨酸的C端結構，可與B細胞產生的J鏈相結合，使IgA形成二聚體或多聚體。聚合體不僅結合抗原的能力增強，J鏈對于SIgA的形成有兩個重要的功能，除了使IgA形成雙聚體，在多聚IgA(多聚免疫球蛋白)與SC/pIgR(多聚免疫球蛋白受體)結合的親和性方面也起了重要作用，在排除抗原方面發揮了重要的作用，不僅可以通過聚集潛在入侵的病原體使之易于蠕動和粘液纖毛運動將其清除，而且SC能通過其糖類殘基使SIgA能與沿著表皮表面的粘膜抗體錨著于適當的組織處，破壞抗原的定位，進而清除抗原，SC上的N-糖基為抗原粘附和凝集素的結合提供了很多表位，因此，SIgA抗體在生殖免疫中起到重要作用。

N-乙酰-L-半胱氨酸為粘液溶解劑，臨床上用于呼吸病人能增加呼吸道粘膜漿液腺的分泌，從而降低痰液粘度，促進肺表面活性物質的分泌，增加支氣管纖毛運動，使痰液易于咳出。本品的巰基(-SH)結構可使粘蛋白的雙硫(-S-S-)結構斷裂，降低宮腔分泌物粘度，胃蛋白酶具有分解蛋白質的作用，使分泌型抗子宮內膜抗體的多聚體轉變為單體而易于ELISA法檢測。采用聚苯乙烯反應板條固相吸附子宮內膜抗原，在反應過程中若被檢樣本存在抗子宮內膜抗體，則與板條中包被的精子抗原結合，形成抗原-抗體復合物，再與酶標記的二抗形成抗原-抗體-抗抗體復合物，并結合在微孔壁表面，通過底物作用在相應檢測孔中出現藍色，用以特異性的檢測分泌物中的抗子宮內膜抗體。

發明內容

本發明的目的是提供一種樣品前處理簡單，提取后可直接測定，簡便、快速、靈敏、準確的檢測分泌型IgA抗子宮內膜抗體的方法。