[發明專利]稻谷內源性酶激活法生產高GABA功能食品材料的方法

有效

• 申請號: 201310095563.9
• 申請日: 2013-03-25
• 公開（公告）號: CN103181523A
• 公開（公告）日: 2013-07-03
• 發明（設計）人: 王立峰;陳靜宜
• 申請（專利權）人: 南京財經大學;王立峰
• 主分類號: A23L1/105
• 分類號: A23L1/105;A23L1/185;A23L1/29;C12N9/88
• 代理公司: 南通市永通專利事務所 32100
• 代理人: 葛雷

技術領域

本發明涉及食品領域，特別是涉及利用稻谷內源性酶激活法生產高GABA功能食品材料的方法，改善食物產品結構和營養結構。

背景技術

作為一種具有多種生理功能的生物活性因子，GABA在美國、日本等國家已廣泛用于營養補充劑和功能食品中，1996年，富含GABA的米胚芽制品在日本實現了商業化。日本科學家利用米胚芽等原料開發制造的富含GABA的功能食品配料，將其應用于飲料、果醬、糕點、餅干、調味料等制品中。現有報道顯示，應用生物技術制造的高濃度GABA飲料以及利用乳酸菌等制作的富含GABA的食品配料，均可直接作為或者用于抗高血壓、增進腦機能及肝功能的功能食品。上世紀九十年代中期，日本ORYZA油化學公司開發出一種名為GABARICEGERM的保健食品添加劑，其后不久，日本食品科學技術學會報道了該產品在改善失眠、抑郁和更年期綜合癥等方面的顯著效果，證實了GABA的多種生理作用，并指出富含GABA的食品是一種功能性食品。2007年日本可口可樂公司推出了面向大眾的、具有放松和抗緊張效果的GABA功能性飲料“AQUARIUS?SHARP?CHARGE”，GABA產品市場得到了進一步的擴展，而我國在這方面的研究尚處于起步階段，亟待發展和提高。

利用高產GABA品種的發芽糙米內源酶轉化提高發芽糙米中GABA的含量，對功能型稻米品種選育，稻米深加工及發芽糙米食品的研究開發具有重要意義。

發明內容

本發明的目的在于提供一種易操作，效果好的稻谷內源性酶激活法生產高GABA功能食品材料的方法。

本發明的技術解決方案是：

一種稻谷內源性酶激活法生產高GABA功能食品材料的方法，其特征是：

（1）在明確稻米內源性谷氨酸脫羧酶特性和活性調節機制的基礎上，采用谷氨酸脫羧酶激活技術，生產高GABA含量的稻米健康食品；

（2）以富含GABA的發芽糙米為原料，采用鈍化分解GABA的轉氨酶預處理，生產留胚GABA精白米；

（3）采用含有谷氨酸脫羧酶激活劑和特殊緩沖體系的天然培養液進行發芽；?

（4）以米糠、米胚芽作為GAD源，將其固定化后生產富集GABA的食品配料，并將其應用到GABA營養配合米粉生產中。

一種稻谷內源性谷氨酸脫羧酶的制備方法，其特征是：包括下列步驟：

（1）γ-氨基丁酸的制備：稱取糙米置于盤中，先用自來水沖洗一遍，洗去表面的雜質和灰塵，再加入4倍體積的水浸泡，將浸泡后的糙米均勻地攤于盤中，加入水，蓋上濕潤的紗布，發芽；然后稱取發芽糙米，加入水磨成漿狀，制成糙米漿；取一定量的糙米漿，在其中加入底物L-谷氨酸、輔酶PLP及激活劑CaCl_2?，在PBS緩沖液中轉化生成GABA；

（2）谷氨酸脫羧酶提取：稱取發芽糙米，加入由磷酸緩沖液、維生素B₆、?EDTA、β-巰基乙醇及NaCL組成的提取緩沖液研磨勻漿，靜置提取后離心，上清液即為谷氨酸脫羧酶提取液；

（3）谷氨酸脫羧酶分離純化：谷氨酸脫羧酶提取液中加入(NH₄)₂SO₄至?30%飽和度，靜置，冷凍離心去除部分雜蛋白；上清液加入(NH₄)₂SO₄至?50%飽和度，靜置，冷凍離心棄去上清液，收集沉淀，沉淀溶于標準緩沖液；在標準緩沖液中透析至無?NH₄⁺，得到?GAD?粗酶液，冷凍干燥保存；采用?DEAE-Sephrose?FF?陰離子交換柱對米胚?GAD?進行分離，控制米胚?GAD?的等電點在?4.5~4.7，分離采用磷酸鉀緩沖液進行梯度洗脫；再取經上述處理得到的米胚?GAD上Superdex?200?凝膠柱，用磷酸鉀緩沖液反復洗脫，即得分離純化后的谷氨酸脫羧酶。

所述的稻谷內源性谷氨酸脫羧酶的制備方法，包括下列步驟：