[發明專利]一種制備奈西立肽的方法

有效

• 申請號: 201310094866.9
• 申請日: 2013-03-22
• 公開（公告）號: CN103275207A
• 公開（公告）日: 2013-09-04
• 發明（設計）人: 肖慶;唐洋明;馬亞平;袁建成
• 申請（專利權）人: 深圳翰宇藥業股份有限公司
• 主分類號: C07K14/58
• 分類號: C07K14/58;C07K1/06;C07K1/04
• 代理公司: 北京北翔知識產權代理有限公司 11285
• 代理人: 張廣育;姜建成

1.一種制備奈西立肽的方法，包括以下步驟：?

1)制備5個片段：?

片段1，即序列(26-32)，H-Leu-Gly-Cys(Trt)-Lys(Boc)-Val-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-His(Trt)-載體樹脂，?

片段2，即序列(19-25)，Fmoc-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-OH，?

片段3，即序列(13-18)，Fmoc-Arg(Pbf)-Lys(Boc)-Met-Asp(tBu)-Arg(Pbf)-Ile-OH，?

片段4，即序列(8-12)，Fmoc-Ser(tBu)-Gly-Cys(Trt)-Phe-Gly-OH，和?

片段5，即序列(1-7)，Fmoc-Ser(tBu)-Pro-Lys(Boc)-Met-Val-Gln(Trt)-Gly-OH；?

2)將片段2和片段1偶聯得到肽樹脂I，即Fmoc-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Leu-Gly-Cys(Trt)-Lys(Boc)-Val-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-His(Trt)-載體樹脂；?

3)將片段3和肽樹脂I偶聯得到肽樹脂II，即Fmoc-Arg(Pbf)-Lys(Boc)-Met-Asp(tBu)-Arg(Pbf)-Ile-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Leu-Gly-Cys(Trt)-Lys(Boc)-Val-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-His(Trt)-載體樹脂；?

4)將片段4和肽樹脂II偶聯得到肽樹脂III，即Fmoc-Ser(tBu)-Gly-Cys(Trt)-Phe-Gly-OH-Arg(Pbf)-Lys(Boc)-Met-Asp(tBu)-Arg(Pbf)-Ile-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Leu-Gly-Cys(Trt)-Lys(Boc)-Val-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-His(Trt)-載體樹脂；?

5)將片段5和肽樹脂III偶聯得到肽樹脂IV，即H-Ser(tBu)-Pro-Lys(Boc)-Met-Val-Gln(Trt)-Gly-OH-Ser(tBu)-Gly-Cys(Trt)-Phe-Gly-OH-Arg(Pbf)-Lys(Boc)-Met-Asp(tBu)-Arg(Pbf)-Ile-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Leu-Gly-Cys(Trt)-Lys(Boc)-Val-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-His(Trt)-載體樹脂；?

6)將肽樹脂IV裂解得到線型奈西立肽；和?

7)將線型奈西立肽氧化得到奈西立肽，?

其中Fmoc為9-芴甲氧羰基，與氨基相連或與羧基所連的碳原子上的氮原子相連。?

2.權利要求1的方法，還包括純化奈西立肽的步驟，純化優選通過重結晶方法或HPLC(例如反相HPLC)而進行。?

3.權利要求1的方法，其中步驟1)-5)在固相反應柱中進行；且其中步驟1)中制備片段1的反應溫度在-30℃至0℃，優選-30℃至-20℃，步驟2)-7)均在室溫和常壓下進行；所述樹脂載體為2-CTC樹脂或王樹脂，優選2-CTC樹脂；所述樹脂的替代度為0.2-1.2mmol/g，優選為0.5-1.1mmol/g，更優選為0.6-1.0mmol/g。?

4.權利要求1的方法，其中步驟1)中的偶聯劑為HOBt/DIC、PyBOP/HOBt，或TBTU/HOBt；步驟2)-5)中的偶聯劑為HOBt/DIC、PyBOP/HOBt/DIPEA，或TBTU/HOBt/DIPEA，優選TBTU/HOBt/DIPEA。?

5.權利要求1的方法，其中步驟1)-5)中偶聯反應的時間通常為1-6小時，優選2-5小時。?

6.權利要求1的方法，其中步驟1)-6)中脫除Fmoc的試劑為DBLK；脫保護反應時間通常為5-30分鐘，優選10-20分鐘。?

7.權利要求1的方法，其中在偶聯之前，將各步驟的肽樹脂中的羧基進行活化，活化在冰水浴中進行；活化劑優選為DIPEA或DIPCDI。?