[發(fā)明專利]一種產(chǎn)朊假絲酵母蛋白制劑及其在養(yǎng)殖中的應(yīng)用

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310087886.3
• 申請日: 2013-03-20
• 公開（公告）號: CN103289907A
• 公開（公告）日: 2013-09-11
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李帥偉;李本濤;何宏軒
• 申請（專利權(quán)）人: 廣州格拉姆生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/16
• 分類號: C12N1/16;A23K1/16;A23K1/18;C12R1/72
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種產(chǎn)朊假絲酵母蛋白制劑的制備方法包括以下步驟：

???（1）?菌種活化：

????本發(fā)明采用產(chǎn)朊假絲酵母（Candida?utilis）作為發(fā)酵菌種，將-80℃保存的產(chǎn)朊假絲酵母菌種在?YPD固體（蛋白胨?10g，酵母提取物?5g，葡萄糖10g，瓊脂粉15g，加水至1升，高溫高壓滅菌備用）斜面上劃線，28℃培養(yǎng)16~24小時；

???（2）制備一級種子：

????將活化的產(chǎn)朊假絲酵母菌種，用接種環(huán)挑取一環(huán)接種于200?mL?YPD液體培養(yǎng)基（蛋白胨?10g，酵母提取物?5g，葡萄糖10g，加水至1升，高溫高壓滅菌備用）中，將三角瓶置于搖床中，28℃，250rpm，振蕩培養(yǎng)16~24小時后，制得一級種子液；

???（3）配制固體發(fā)酵培養(yǎng)基：固體干基：以玉米粉和小麥粉為基礎(chǔ)料（質(zhì)量比為3:1），葡萄糖2%，K2HPO4?1.0%，生物素0.01%；將固體干基加入質(zhì)量比為1:1~2的無菌水，調(diào)pH值至5.5，攪拌均勻；將固體培養(yǎng)基經(jīng)121℃、20min高溫高壓滅菌，待冷卻后即可作為固體發(fā)酵培養(yǎng)基使用；??

???（4）固體發(fā)酵：將經(jīng)過滅菌處理的固體發(fā)酵培養(yǎng)基按照8~10%的接種量接入一級種子菌，攪拌均勻，保持濕度為50~70%，溫度為25~28℃，培養(yǎng)16個小時左右，制得二級種子；將二級種子按照8~10%的接種量加入滅菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基中進行擴大培養(yǎng)，攪拌均勻，保持濕度為50~70%，溫度為25~28℃，培養(yǎng)16個小時左右，制得三級種子；可以根據(jù)具體的培養(yǎng)用量，進一步將三級種子按照8~10%的接種量進一步擴大培養(yǎng)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的產(chǎn)朊假絲酵母蛋白固體發(fā)酵生產(chǎn)，其特征在于所述的固體干基：以玉米粉和小麥粉為基礎(chǔ)料（質(zhì)量比為3:1），葡萄糖2%，K2HPO4??1.0%，生物素0.01%。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的產(chǎn)朊假絲酵母蛋白固體發(fā)酵，其特征在于：培養(yǎng)溫度為25~28℃，濕度為50~70%。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的產(chǎn)朊假絲酵母蛋白固體發(fā)酵，其特征在于：各級種子菌接種量為8~10%的接種量。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的產(chǎn)朊假絲酵母蛋白固體發(fā)酵，其特征在于：所用的菌種為假絲酵母屬的產(chǎn)朊假絲酵母種。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的產(chǎn)朊假絲酵母蛋白固體發(fā)酵，其特征在于：作為飼料添加劑的添加量為0.5~2%。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的產(chǎn)朊假絲酵母蛋白固體發(fā)酵，其特征在于：作為飼料添加劑的應(yīng)用領(lǐng)域為畜禽飼料添加劑。