[發明專利]電轉染的方法及設備有效
| 申請號: | 201310086625.X | 申請日: | 2013-03-18 |
| 公開(公告)號: | CN103146750A | 公開(公告)日: | 2013-06-12 |
| 發明(設計)人: | 莫邦輝;馬雨;王永生;魏于全 | 申請(專利權)人: | 四川大學 |
| 主分類號: | C12N15/85 | 分類號: | C12N15/85;C12N15/86;C12M1/42 |
| 代理公司: | 成都虹橋專利事務所(普通合伙) 51124 | 代理人: | 劉世平 |
| 地址: | 610065 四川*** | 國省代碼: | 四川;51 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 轉染 方法 設備 | ||
1.電轉染的方法,其特征包括:對細胞進行四次放電,放電之間進行兩次暫停:
第一次放電:電壓為500~1500V的正向脈沖,持續時間20~60μs;
第一次暫停:暫停持續時間600~1200μs;
第二次放電:電壓為500~1500V的負向脈沖,持續時間20~60μs;
第二次暫停:暫停持續時間600~1200μs;
第三次放電:電壓為500~1500V的正向脈沖,持續時間10~50μs;
第四次放電:電壓為100~300V的正向電泳電場,持續時間20~100ms。
2.如權利要求1所述的電轉染的方法,其特征為:第一次放電的電壓為800~1100V的正向脈沖,持續時間35~45μs。
3.如權利要求1所述的電轉染的方法,其特征為:第一次暫停的暫停持續時間800~1000μs。
4.如權利要求1所述的電轉染的方法,其特征為:第二次放電的電壓為800~1100V的負向脈沖,持續時間35~45μs。
5.如權利要求1所述的電轉染的方法,其特征為:第二次暫停的暫停持續時間800~1000μs。
6.如權利要求1所述的電轉染的方法,其特征為:第三次放電的電壓為800~1100V的正向脈沖,持續時間15~25μs。
7.如權利要求1所述的電轉染的方法,其特征為:第四次放電的電壓為150~200V的正向電泳電場,持續時間40~60ms。
8.如權利要求1至7之一所述的電轉染的方法,其特征為:配合使用的電轉染緩沖液組分為:PBS緩沖液,濃度30~200mM;Tris-HCl,濃度30~150mM;Ca(NO3)2,濃度0.2~1mM;KCl,濃度2~8mM;MgCl2,濃度10~20mM;NaCl,濃度50~150mM;葡萄糖,濃度5~30mM;pH為6.5~pH7.2。
9.如權利要求1至7之一所述的電轉染的方法,其特征為:配合使用的電轉染緩沖液組分為:PBS緩沖液,濃度30~200mM;Tris-HCl,濃度30~150mM;Ca(NO3)2,濃度0.2~1mM;KCl,濃度2~8mM;MgCl2,濃度10~20mM;NaCl,濃度50~150mM;pH為6.5~pH7.2。
10.用于權利要求1所述方法的電轉染的設備,其特征為:包括順序連接的顯示電路、控制電路、邏輯電路和驅動電路,在驅動電路中通過導通元件將驅動電路與低壓直流電源連接,驅動電路的輸出端還通過全橋電路與高壓直流電源連接,全橋電路的輸出端連接負載,并通過電流檢測電路連接所述的控制電路。
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