[發(fā)明專利]用分子印跡電化學發(fā)光傳感器檢測微量赤霉素A3的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310085877.0
• 申請日: 2013-03-18
• 公開（公告）號: CN103163124A
• 公開（公告）日: 2013-06-19
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李建平;黎舒懷;魏小平
• 申請（專利權(quán)）人: 桂林理工大學
• 主分類號: G01N21/76
• 分類號: G01N21/76;G01N21/66
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種用分子印跡電化學發(fā)光傳感器檢測微量赤霉素A3的方法，其特征在于具體步驟為：

（1）金電極的處理：

依次用1.0、0.3和0.05μm氧化鋁粉將金電極拋光后，分別在無水乙醇和水中各超聲洗滌5分鐘，然后在0.5?mol/L?H₂SO₄中于-0.2?~?1.0?V進行循環(huán)伏安即CV電化學處理，直到獲得穩(wěn)定的CV響應(yīng)；

（2）赤霉素A3分子印跡電化學發(fā)光傳感器的制備：

先將0.009?~?0.036g鄰苯二胺用10?mLpH=5.2的醋酸緩沖液溶解，然后加入2×10^-4?~?8×10^-4?mol/L的赤霉素A3溶液，充分混合均勻，用循環(huán)伏安法掃描20?~?40圈，掃描范圍-0.2?~?1.0V，掃速50?mV/s；聚合完成后將金電極取出，用二次蒸餾水沖洗干凈后，放入體積比為7?~?9:1的無水甲醇-冰醋酸體系中，在攪拌下洗滌金電極表面的聚合膜5?~?15分鐘，除去聚合物膜中的赤霉素A3以及吸附在分子印跡膜上的其它吸附物，制成保留有模板分子構(gòu)型孔穴的赤霉素A3分子印跡電化學發(fā)光傳感器；

（3）檢測方法：

首先將步驟(2)制得的赤霉素A3分子印跡電化學發(fā)光傳感器置于羅丹明B標記的赤霉素A3的溶液中孵化18分鐘，然后取出赤霉素A3分子印跡電化學發(fā)光傳感器沖洗表面；將孵化完全的赤霉素A3分子印跡電化學發(fā)光傳感器分別放入0、1×10^-11、3×10^-11、6×10^-11、12×10^-11、25×10^-11、50×10^-11、80×10^-11、120×10^-11、160×10^-11、200×10^-11、250×10^-11、300×10^-11?mol/L的赤霉素A3標準溶液中進行競爭吸附10?~?20分鐘；最后接入檢測體系，檢測體系為：10?mL?含1.2×10^-3?mol/L魯米諾的0.05mol/L?Tris-HCl緩沖溶液，Tris-HCl緩沖溶液pH=7.8；用MPI-E型電致化學發(fā)光分析系統(tǒng)進行電致化學發(fā)光掃描，掃描電壓-0.3?~?0.8?V，掃速為100?mV/s，光電倍增管高壓900?V，采樣速率10?T/S，放大倍數(shù)4，測量時間90?s；

（4）標準工作曲線的繪制：

在15?mL小燒杯中加入10?mL含1.2×10^-3?mol/L魯米諾的0.05?mol/L?Tris-HCl緩沖溶液，Tris-HCl緩沖溶液pH=7.8；將已在羅丹明B標記赤霉素A3溶液中孵化完全的赤霉素A3分子印跡電化學發(fā)光傳感器浸入10?mL赤霉素A3標準溶液中競爭吸附15分鐘，進行電致化學發(fā)光檢測；赤霉素A3在1.0×10^-11?~?3.0×10^-9?mol/L濃度范圍內(nèi)與電化學發(fā)光強度減少值??I_F呈良好的線性關(guān)系，線性方程分別為：?I_F?=?11.51?C?(10^-11?mol/L)?+?134.44，線性相關(guān)系數(shù)r?=0.999；

（5）樣品中赤霉素A3含量的測定：

在15?mL小燒杯中加入10?mL含1.2×10^-3?mol/L魯米諾的0.05?mol/L?Tris-HCl緩沖溶液，Tris-HCl緩沖溶液pH=7.8；將在羅丹明B標記赤霉素A3溶液中孵化完全的赤霉素A3分子印跡電化學發(fā)光傳感器浸入10?mL赤霉素A3溶液中競爭吸附15分鐘；利用電致化學發(fā)光分析系統(tǒng)對待測液進行電致化學發(fā)光掃描，掃描電壓掃描電壓-0.3?~?0.8?V，掃速為100?mV/s，光電倍增管高壓900V，采樣速率10?T/S，放大倍數(shù)4，測量時間90?s，得到電化學發(fā)光強度I_F；根據(jù)校正曲線計算出赤霉素A3的濃度C。