[發明專利]利用枸杞多糖制備小分子量功能性多糖及寡糖的方法

有效

• 申請號: 201310085095.7
• 申請日: 2013-03-18
• 公開（公告）號: CN103172759A
• 公開（公告）日: 2013-06-26
• 發明（設計）人: 趙兵;趙慶生;查圣華;王曉東
• 申請（專利權）人: 中國科學院過程工程研究所
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;C12P19/20;C12P19/14;C13K13/00
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技術領域

本發明涉及生物醫藥技術領域，具體地涉及利用枸杞多糖制備小分子量功能性多糖及寡糖的方法。

背景技術

枸杞(Lycium?bararum?L.)是我國傳統藥食同源中藥材，具有補腎養肝、潤肺明目、益精、補血等功效。臨床醫學研究還表明，枸杞子對糖尿病、高血壓、視神經萎縮、腎炎、肝炎等有顯著療效。這些藥理作用與枸杞活性多糖有關。

枸杞多糖(Lycium?barbarum?polysaccharides，LBP)是枸杞的有效成分之一。經研究發現，LBP具有降血糖、抗疲勞、增強免疫、耐缺氧、延緩衰老、促進排鉛等多種生物功能。因此LBP作為天然抗氧化劑具很高的開發價值。LBP組成較為復雜，分子量分布范圍較廣，可從幾千到幾十萬。黃琳娟等從制備枸杞多糖LBP經DEA-cellulose，Sephadex柱層析得到均一組分LbGP3、LbGP4和LbGP5，分子量分別為9.25×10⁴、21.48×10⁴和2.37×10⁴(黃琳娟等,藥學學報,1998,33(7):512-516)。趙春久等分離的4種枸杞多糖在8000到66000之間（北京醫科大學學報,1997,29(3):231-233），何進等采用DEAE纖維素柱層析和凝膠柱層析法分離純化3種枸杞多糖分子量均大于2萬（中國藥學雜志,1996,31(12):716-720）。徐鵬利用水做溶劑從枸杞中提取糖類成分,經體積分數95%乙醇沉淀脫蛋白質和多糖,再經大孔樹脂分離,得到的低聚糖通過離子交換和凝膠柱層析,得到了2個低聚糖組分。經ESI-MS分析測定低聚糖的平均分子量分別為666.4,504.3（食品與發酵工業,2009,35:196-198）。

研究表明，多糖的生物活性與其相對分子量大小有關，相對分子量越大，體積越大，越不利于多糖跨越多重細胞膜障礙而進入生物體內發揮生物學活性。袁振林研究表明只有分子量在20000左右的枸杞多糖對S-180腫瘤和路易絲肺癌有較好的療效（廣東化工,2003,3:43-45）。李越鯤研究不同分子量枸杞多糖的體外抗氧化活性，采用膜分離技術對枸杞多糖(LBP)進行分離，以得到分子量<l萬(LBP1)、1～3萬(LBP2)、3～5萬(LBP3)、>5萬(LBP4)的多糖，并對LBP及這4種小分子枸杞多糖的體外抗氧化活性進行測定。結果表明不同分子量的小分子多糖抗氧化活性均高于粗多糖，其中LBP2清除超氧院離子自由基作用、清除羥自由基活性、總抗氧化能力最強，顯著高于LBP（安徽農業科學,2012,40(29):14174-14175）。潘志強經糖化酶降解枸杞多糖相對分子質量由30000降到17000左右，并研究表明:中相對分子質量的枸杞多糖可顯著增加小鼠脾臟指數;可顯著增強巨噬細胞的吞噬能力，提高機體對病原微生物的抵抗力;可顯著促進T及B淋巴細胞的增殖，從而增強機體的體液免疫和細胞免疫功能(藥物研究,2010,19:13-14)。王博采用非特異性酶PronaseE和β-消除反應釋放糖鏈，然后酸降解得到以半乳糖為主要糖組成的聚合度為2～8寡聚半乳聚糖主鏈，命名為OL-oligosaccharides，并檢測了片段的免疫活性（西北大學,2011年碩士學位論文,枸杞糖復合物LbGp4的降解及其活性寡糖片斷的初步探究）。姚瑞祺等采用5種不同截留分子量的超濾膜分離LBP測定不同分子量枸杞多糖(LBP)的含量和鐵離子還原力(FRAP)法測定抗氧化活性。結果得到6種不同分子量的LBP樣品液,其中分子量5000以下的LBP占74.5%，FRAP值0.745;5000～1萬的占11.0%，FRAP值0.597;1～3萬的占7.7%，FRAP值0.923;3～10萬的占2.4%，FRAP值1.060;10～30萬的占2.4%，FRAP值0.720;30萬以上的占1.9%，FRAP值0.401。結論為分子量在5000以下的LBP為總多糖的主要功效成分,開發利用價值最大（姚瑞祺等,食品工業科技,2008,29:89-91）。