[發明專利]一種抗菌肽混合液及其用于食品保鮮的方法

有效

• 申請號: 201310082580.9
• 申請日: 2013-03-15
• 公開（公告）號: CN103404939A
• 公開（公告）日: 2013-11-27
• 發明（設計）人: 張明;李蕾;姜潔;陳曉琳;祁克宗
• 申請（專利權）人: 安徽農業大學
• 主分類號: A23L3/3571
• 分類號: A23L3/3571
• 代理公司: 合肥和瑞知識產權代理事務所(普通合伙) 34118
• 代理人: 王挺;劉坤

技術領域

本發明屬于微生物資源利用技術領域，具體涉及一種抗菌肽混合液及其用于食品保鮮的方法。

背景技術

豆腐由于含有蛋白質、脂肪、糖類和水分等成分，極利于微生物的生長。但高溫殺菌、微波輻射等物理保質方法容易造成豆腐質構變化和口感下降，化學防腐劑又會對人體健康和生態環境產生不利的影響。因此有必要研究具有良好抑菌作用的天然生物保鮮物質來延長食品保質期。已有的研究證明天然色素、大蒜素、竹葉提取液以及中草藥等天然植物體提取物對豆腐都有一定的防腐保鮮作用。但目前使用的大部分天然植物體提取物都是粗制品，其有效成份含量常隨季節和地理環境而改變，且具體作用成分還不甚清楚，難以分離出純品進行毒理學評價。另外，各種防腐劑的作用機理、抗菌譜和應用范圍等研究的也不夠深刻。因此有必要開發更高效更安全的生物防腐劑。

乳酸菌自古以來就廣泛使用于食品的防腐保鮮，乳酸菌分泌產生的小分子肽類物質可被人體分泌的酶降解，其安全性顯示了在食品保鮮中的應用價值。乳酸乳球菌乳酸亞種產生的細菌素Nisin是FAO批準的唯一可用于食品保鮮的細菌素，它可以抑制或殺死一些革蘭氏陽性的病原菌和食物腐敗菌，且具有高效、無毒、無殘留、無抗藥性等優點，廣泛應用于牛奶、奶酪、罐裝食品、魚肉制品、啤酒、飲料等的防腐保鮮。由于Nisin只能在酸性條件下呈可溶性狀態，在中性條件下溶解性低，穩定性差，極大地影響了Nisin在豆制品保鮮中的應用。

發明內容

本發明的目的之一是提供一種可用于食品保鮮的抗菌肽混合液。

為實現上述目的，本發明采用了以下技術方案：一種抗菌肽混合液，本抗菌肽混合液由兩種菌株制備的抗菌肽混合而成，其中：

一種乳酸乳球菌乳酸亞種（Lactococcus?lactis?subsp.lactis）LLC518，其在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心的保藏編號為：CGMCCNo.4584；

一種清酒乳桿菌（Lactobacillus?sakei）LSJ618，其在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心的保藏編號為：CGMCC?No.7017；

通過發酵所述乳酸乳球菌乳酸亞種乳酸亞種（Lactococcus?lactis?subsp.lactis）LLC518而得到的抗菌肽，命名為Lacticin?LLC518；通過發酵所述清酒乳桿菌（Lactobacillus?sakei）LSJ618而得到的抗菌肽，命名為Sakacin?LSJ618；

將抗菌肽Lacticin?LLC518和Sakacin?LSJ618以質量比為1:1的比例混合得到混合物，再將得到的所述混合物和水以質量比為1:10的比例相混合即可得到本抗菌肽混合液。

抗菌肽的制備方法通過以下途徑：

首先從MRS固體斜面培養基上挑取已活化的乳酸乳球菌乳酸亞種乳酸亞種（Lactococcus?lactis?subsp.lactis）LLC518和清酒乳桿菌（Lactobacillus?sakei）LSJ618，并分別接種于MRS液體種子培養基中，37℃搖床培養12小時，再按4%的接種量分別接種于MRS發酵培養基中，37℃靜置培養24h，即可得到乳酸乳球菌乳酸亞種乳酸亞種（Lactococcus?lactis?subsp.lactis）LLC518發酵液和清酒乳桿菌（Lactobacillus?sakei）LSJ618發酵液：將兩種發酵液分別經陶瓷膜過濾除菌后，再噴霧干燥即可分別得到粉末狀的Lacticin?LLC518成品和Sakacin?LSJ618成品。

噴霧干燥步驟的具體條件如下：將乳酸乳球菌乳酸亞種乳酸亞種（Lactococcus?lactis?subsp.lactis）LLC518發酵液和清酒乳桿菌（Lactobacillus?sakei）LSJ618發酵液分別在溫度25℃的條件下，通過操作壓力為0.02Mpa，膜孔徑為0.2μm的陶瓷膜過濾后得到去除菌體的上清液，分別向兩種上清液中加入固體食鹽，所加入的固體食鹽的質量占所述上清液體積的比例為1:10，待固體食鹽完全溶解后通過噴霧干燥機進行噴霧干燥，所述噴霧干燥機的進風溫度為150℃，出風溫度為130℃，噴霧干燥后即得到粉末狀的Lacticin?LLC518成品和Sakacin?LSJ618成品。