[發(fā)明專利]一種阿旁宮壽組培再生體系建立的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310080649.4
• 申請日: 2013-03-13
• 公開（公告）號: CN103125394A
• 公開（公告）日: 2013-06-05
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王燕;陳劍平;汪一婷;牟豪杰;呂永平;陳志
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 杭州九洲專利事務(wù)所有限公司 33101
• 代理人: 陳繼亮

1.一種阿旁宮壽組培再生體系建立的方法，其特征在于：該方法包括如下步驟：?

1）、培養(yǎng)基的配制：?

（1）基本培養(yǎng)基：MS培養(yǎng)基，其中蔗糖20～30g/L，瓊脂5～9g/L，pH=5.8；?

（2）誘導(dǎo)培養(yǎng)基：MS+6-BA4～8mg/L+NAA0.05～0.5mg/L；?

（3）分化培養(yǎng)基：MS+6-BA0.05～0.5mg/L+NAA0.05～0.5mg/L；?

（4）增殖培養(yǎng)基：MS+6-BA0.5～1.0mg/L+NAA0.05～0.2mg/L；?

（5）壯苗培養(yǎng)基：MS+6-BA0.05～0.1mg/L+NAA0.05～0.1mg/L；?

2）外植體的選取與消毒：取阿房宮壽的幼嫩花序，將花蕾清洗消毒后備用；?

3）愈傷組織的誘導(dǎo)及增殖：將步驟2）消毒處理后的花蕾在無菌條件下接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，經(jīng)1～2個月后誘導(dǎo)出愈傷組織，將愈傷組織轉(zhuǎn)接到新鮮的誘導(dǎo)培養(yǎng)基上進行增殖培養(yǎng)；?

4）不定芽的分化及增殖：將步驟3）愈傷組織在無菌條件下轉(zhuǎn)接到分化培養(yǎng)基上，培養(yǎng)20～40天后分化出不定芽，將不定芽叢切割成小叢后轉(zhuǎn)接到增殖培養(yǎng)基上以叢生芽方式增殖；?

5）壯苗培養(yǎng)：將步驟4）叢生芽在無菌條件下切割成單株后轉(zhuǎn)接到壯苗培養(yǎng)基上，培養(yǎng)30～50天后其植株直徑可大3～5cm；?

6)移栽：將步驟5）壯苗切除根部后清洗并晾干，然后移栽至多肉植物顆粒土基質(zhì)中栽培。?

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的阿旁宮壽組培再生體系建立的方法，其特征在于：在所述步驟1）中，所述的培養(yǎng)基包括基本培養(yǎng)基和組培各階段培養(yǎng)基的組分具體為：?

（1）基本培養(yǎng)基：MS培養(yǎng)基，其中蔗糖20～30g/L，瓊脂5～9g/L，pH=5.8;?

（2）誘導(dǎo)培養(yǎng)基：MS+6-BA6mg/L+NAA0.5mg/L;?

（3）分化培養(yǎng)基：MS+6-BA0.2mg/L+NAA0.2mg/L;?

（4）增殖培養(yǎng)基：MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L;?

（5）壯苗培養(yǎng)基：MS+6-BA0.05mg/L+NAA0.05mg/L。?

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的阿旁宮壽組培再生體系建立的方法，其特征在于：在所述步驟2）中，所述的消毒處理是去除花序上閉合花蕾的外包片，再將花蕾連同部分花葶逐個切下，先用洗衣粉溶液浸泡20～60min后再用自來水沖洗干凈，然后依次在體積比為70%的酒精和有效氯濃度為1%的次氯酸鈉溶液中分別浸泡0.5～1min和4～7min，最后用無菌水沖洗3～5次。?

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的阿旁宮壽組培再生體系建立的方法，其特征在于：在所述步驟3）中，所述消毒處理后的花蕾，先用解剖刀將其基部切傷后接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，并使傷口接觸到培養(yǎng)基。?

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的阿旁宮壽組培再生體系建立的方法，其特征在于：在所述步驟6）中，所述切除根部的壯苗清洗后置于通風(fēng)避光處3～10天晾至微微皺縮后移栽至多肉植物顆粒土基質(zhì)中栽培。?

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的阿旁宮壽組培再生體系建立的方法，其特征在于：在所述步驟3）中，所述的培養(yǎng)條件是，培養(yǎng)溫度為23±2℃、光照強度為30～60μmol·m^-2·s^-1、光照?時間為8～10小時/天。?

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的阿旁宮壽組培再生體系建立的方法，其特征在于：在所述步驟4）、5）中，所述的培養(yǎng)條件是，培養(yǎng)溫度為23±2℃、光照強度為80～120μmol·m^-2·s^-1、光照時間為8～12小時/天。?