[發明專利]轉基因大豆MON89788轉化事件的檢測方法和試劑盒

無效

• 申請號: 201310080635.2
• 申請日: 2013-03-14
• 公開（公告）號: CN103409498A
• 公開（公告）日: 2013-11-27
• 發明（設計）人: 于常海;楊濱;張明;李飛武;劉樂庭
• 申請（專利權）人: ?？瞪锟萍?北京)有限公司;吉林省農業科學院
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種檢測轉基因大豆MON89788轉化事件的方法，其包括以下步驟：

(a)將樣品DNA95℃變性后立即冰置，使用特異性識別MON89788外源DNA區的特異引物對，在RNA聚合酶的作用下轉錄生成RNA；所述引物之一包含所述RNA聚合酶的識別序列；

(b)使用上述特異引物對，對上述所得RNA進行NASBA擴增，得RNA擴增產物；

(c)分別設計捕獲探針和檢測探針，對上述RNA擴增產物進行檢測。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述RNA聚合酶為T7RNA聚合酶。

3.如權利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述引物對分別包含SEQ?ID?No.3和SEQ?ID?No.4所示核苷酸序列。

4.如權利要求3所述的方法，其特征在于，所述引物對序列分別如SEQ?ID?No.5和SEQ?ID?No.6所示。

5.如權利要求4所述的方法，其特征在于，所述捕獲探針包含SEQ?ID?No.7所示序列，所述檢測探針包含SEQ?IDNo.8所示序列。

6.一種檢測轉基因大豆MON89788轉化事件的NASBA檢測試劑盒，其特征在于，包括所構建的陽性質粒對照，包括特異性識別MON89788外源DNA區的引物對，RNA聚合酶，以及可特異性與上述引物對介導的NASBA擴增產物雜交的捕獲探針和檢測探針，所述引物之一包含所述RNA聚合酶的識別序列。

7.如權利要求6所述的試劑盒，其特征在于，所述引物對分別包含SEQ?ID?No.3和SEQ?ID?No.4所示核苷酸序列。

8.如權利要求7所述的試劑盒，其特征在于，所述引物對序列分別如SEQ?IDNo.5和SEQ?IDNo.6所示。

9.如權利要求8所述的試劑盒，其特征在于，所述捕獲探針包含SEQ?ID?No.7所示核苷酸序列，所述檢測探針包含SEQ?ID?No.8所示核苷酸序列。

10.如權利要求9所述的試劑盒，其特征在于，所述構建陽性質粒對照引物對包含SEQ?IDNo.9SEQ?IDNo.10和所示核苷酸序列。