[發(fā)明專利]一種同時(shí)檢測(cè)多種黃曲霉毒素傳感器的制備方法及應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310079759.9
• 申請(qǐng)日: 2013-03-13
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103196984A
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-07-10
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 杜斌;魏琴;黎榮霞;于海琴;張勇;吳丹;李賀;馬洪敏
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 濟(jì)南大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N27/48
• 分類號(hào): G01N27/48
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1.一種同時(shí)檢測(cè)多種黃曲霉毒素傳感器的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）在一個(gè)涂覆一層聚酯薄膜的矩形基片（①）表面上，依次以銀漿印刷1個(gè)參比電極（②），以導(dǎo)電碳漿印刷5個(gè)工作電極（③）、1個(gè)對(duì)電極（④）、7個(gè)電極引出線（⑤）及引出線端部（⑥），并在所有電極及電極引出線端部以外的基片上，以絕緣漿印刷一層絕緣層，并在電極區(qū)域形成一個(gè)圓形電解池凹槽（⑦），制得五通道絲網(wǎng)印刷電極；

（2）在（1）所述的五通道絲網(wǎng)印刷電極的5個(gè)工作電極上，滴涂5?~?10μL銀納米粒子—氮摻雜石墨烯—羥丙基殼聚糖構(gòu)成的導(dǎo)電復(fù)合納米材料溶液；所述導(dǎo)電復(fù)合納米材料溶液，其特征是，將銀納米粒子和氮摻雜石墨烯一定的質(zhì)量比進(jìn)行混合超聲分散30min，然后加上質(zhì)量分?jǐn)?shù)1.0%的羥丙基殼聚糖溶液超聲混合30min，制成質(zhì)量比為（1?~?5）:（8?~?12）:（1~?10）的銀納米粒子—氮摻雜石墨烯—羥丙基殼聚糖導(dǎo)電復(fù)合納米材料溶液；

（3）在步驟（2）制得的5個(gè)工作電極上分別滴加5?~?10μL的黃曲霉毒素B1抗體、黃曲霉毒素B2抗體、黃曲霉毒素G1抗體、黃曲霉毒素G2抗體及總黃曲霉毒素抗體，再以10μL、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%的牛血清白蛋白封閉電極上的非特異性活性位點(diǎn)，制得一種同時(shí)檢測(cè)多種黃曲霉毒素傳感器，置于4?℃下保存?zhèn)溆茫隹贵w濃度均5?~?10?μg/mL。

2.一種同時(shí)檢測(cè)多種黃曲霉毒素的方法，該方法包括以下步驟：

（1）將黃曲霉毒素B1、黃曲霉毒素B2、黃曲霉毒素G1、黃曲霉毒素G2及總黃曲霉毒素的標(biāo)準(zhǔn)溶液分別滴涂到權(quán)利要求1所述的方法制備的一種同時(shí)檢測(cè)多種黃曲霉毒素傳感器對(duì)應(yīng)的工作電極表面上，孵化2?~?3?h，然后用pH為7.4的磷酸鹽緩沖溶液清洗干凈，得到修飾好的工作電極；

（2）將參比電極、步驟（1）所述修飾好的工作電極和對(duì)電極連接在電化學(xué)工作站上，在電解槽中加入5?mmol/L的鐵氰化鉀溶液，通過(guò)循環(huán)伏安法檢測(cè)所述修飾好的工作電極的電流響應(yīng)；

（3）根據(jù)所得電流響應(yīng)與黃曲霉毒素B1、黃曲霉毒素B2、黃曲霉毒素G1和黃曲霉毒素G2（簡(jiǎn)稱4種黃曲霉毒素）及總黃曲霉毒素的標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度之間的關(guān)系，繪制工作曲線；?

（4）用待測(cè)樣品代替4種黃曲霉毒素及總黃曲霉毒素的標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照所述4種黃曲霉毒素及總黃曲霉毒素工作曲線的繪制方法進(jìn)行檢測(cè)，其檢測(cè)結(jié)果對(duì)照所繪制的4種黃曲霉毒素及總黃曲霉毒素工作曲線，計(jì)算出樣品中4種黃曲霉毒素及總黃曲霉毒素的含量。