[發明專利]一種干酪乳桿菌大豆酸乳直投式發酵劑的制備方法

有效

• 申請號: 201310079337.1
• 申請日: 2013-03-13
• 公開（公告）號: CN103141723A
• 公開（公告）日: 2013-06-12
• 發明（設計）人: 田洪濤;谷新晰;李晨;楊雪聰;田晶晶;李麗微;檀建新;王羽
• 申請（專利權）人: 河北農業大學
• 主分類號: A23L1/03
• 分類號: A23L1/03;A23C11/10
• 代理公司: 石家莊新世紀專利商標事務所有限公司 13100
• 代理人: 董金國

1.一種干酪乳桿菌大豆酸乳直投式發酵劑的制備方法，其特征在于包括以下步驟：

（1）干酪乳桿菌的增殖培養

①干酪乳桿菌廉價增菌培養基的制備

a．干酪乳桿菌菊芋汁基礎培養基的制備

原料：菊芋，蒸餾水；?

制備工藝：(a)菊芋清洗、稱重；(b)?菊芋與水按質量體積比為1:1混合；(c)加熱滅酶：加熱至100℃，煮沸5min；(d)加水搗碎：補加適量80℃熱水，在搗碎機中將菊芋和水搗碎成漿狀；(e)過濾：用100目濾布擠壓過濾；(f)濾渣加水壓榨：濾渣補加適量80℃熱水擠壓過濾；(g)濾汁混合、定容：將兩次過濾的濾汁混合，用蒸餾水定容至1kg菊芋生產1L汁；(h)調配：將菊芋汁加熱濃縮至含糖量為10%，用NaOH溶液調節pH至7.0，制得干酪乳桿菌菊芋汁基礎培養基，備用；

b．干酪乳桿菌復合增菌培養基的制備

原料及配比：干酪乳桿菌菊芋汁基礎培養基100mL，酵母膏0.5～0.8g，蛋白胨0.3～0.6g，大豆蛋白胨1.2～1.6g，牛肉膏0.8～1.2g，甘油0.1mL；

制備工藝：將酵母膏、蛋白胨、大豆蛋白胨、牛肉膏、甘油添加到干酪乳桿菌菊芋汁基礎培養基中，用NaOH溶液調節pH值至6.5～7.0，121℃?15min滅菌、冷卻，備用；

②干酪乳桿菌增殖培養

干酪乳桿菌經MRS液體培養基活化后，以0.1%～0.5%接種量接入pH值為6.5～7.0的菊芋汁復合增菌培養基中，在有氧條件下35～37℃培養16～18h至對數末期或穩定初期，活菌數達4～5×10⁹cfu/mL，獲得干酪乳桿菌的高濃度培養物；

（2）干酪乳桿菌細胞的濃縮分離

干酪乳桿菌高濃度培養物在常溫下5000～7500r/min離心10～20min進行細胞濃縮分離，離心后棄去上清液，獲得活菌收得率高于95%的干酪乳桿菌濃縮細胞；

（3）在干酪乳桿菌濃縮細胞中添加復合保護劑

復合保護劑配方：蒸餾水100mL，β-環狀糊精10g，蔗糖6～7g，甘油0.1～0.2g，酵母粉1.0～1.2g，維生素E?0.3～0.6g；

復合保護劑制備工藝：①在蒸餾水中添加蔗糖、甘油、酵母粉，加熱溶解混勻，冷卻至室溫；②用NaOH溶液調節pH值至6.8～7.0；③115℃滅菌10min，冷卻至室溫；④在無菌條件下加入經過105℃?、60min干熱滅菌并冷卻后的β-環狀糊精和經過濾除菌后的維生素E，混勻；

在干酪乳桿菌濃縮細胞中添加復合保護劑工藝：在干酪乳桿菌濃縮細胞中添加菌株高濃度培養物體積20%～30%的復合保護劑，制成干酪乳桿菌菌懸液，混勻；

（4）干酪乳桿菌直投式發酵劑的凍干工藝

?將添加了復合保護劑的干酪乳桿菌菌懸液分裝于凍干盤或瓶內，厚度0.75cm，-20℃冷凍12h；在冷凍干燥機中于真空度3～10Pa、冷阱溫度-55～-45℃下真空冷凍干燥11～13h，制成干酪乳桿菌凍干發酵劑成品。