[發明專利]表達人血清白蛋白的質粒和重組菌以及它們的應用

有效

• 申請號: 201310078280.3
• 申請日: 2013-03-12
• 公開（公告）號: CN103194481A
• 公開（公告）日: 2013-07-10
• 發明（設計）人: 徐存拴;史世領;史世會;張全義;常翠芳;趙茜怡
• 申請（專利權）人: 河南新鄉華星藥廠
• 主分類號: C12N15/81
• 分類號: C12N15/81;C12N1/19;C12P21/02;C12R1/84
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

1.一種重組質粒，包括表達盒甲和表達盒乙；

所述表達盒甲自上游至下游依次包括：序列表的序列3所示的AOX1啟動子、人血清白蛋白的編碼基因、序列表的序列4所示的CYC1翻譯終止子；

所述表達盒乙自上游至下游依次包括：序列表的序列5所示的GAP啟動子、所述人血清白蛋白的編碼基因、序列表的序列6所示的AOX1翻譯終止子；

所述人血清白蛋白為如下（1）或（2）：

（1）由序列表中序列11所示的氨基酸序列組成的蛋白質；

（2）將序列11的氨基酸序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由序列11衍生的蛋白質。

2.如權利要求1所述的重組質粒，其特征在于：所述人血清白蛋白的編碼基因為如下1）或2）或3）或4）或5）的DNA分子：

1）編碼區如序列表中序列2自5’末端第13至1842位核苷酸所示的DNA分子；

2）序列2自5’末端第7至1842位核苷酸所示的DNA分子；

3）序列表中序列2所示的DNA分子；

4）在嚴格條件下與1）或2）或3）限定的DNA序列雜交且編碼具有相同功能的蛋白的DNA分子；

5）與1）或2）或3）限定的DNA序列具有90%以上同源性且編碼具有相同功能的蛋白的DNA分子。

3.如權利要求1或2所述的重組質粒，其特征在于：所述重組質粒還包括DNA片段丙；所述DNA片段丙包括序列表的序列7所示的ADE2啟動子和序列表的序列8所示的ADE2基因，且由所述ADE2啟動子啟動所述ADE2基因的表達。

4.將權利要求1至3中任一所述的重組質粒導入宿主菌得到的工程菌。

5.如權利要求4所述的工程菌，其特征在于：所述宿主菌為畢赤酵母。

6.如權利要求5所述的工程菌，其特征在于：所述畢赤酵母為PichiaPink^TM?Strain1（ade2）。

7.權利要求4或5或6所述的工程菌在生產人血清白蛋白中的應用。