[發明專利]用于檢測玉簪屬植物病毒X的引物組及其應用

有效

• 申請號: 201310072636.2
• 申請日: 2013-03-07
• 公開（公告）號: CN103131799A
• 公開（公告）日: 2013-06-05
• 發明（設計）人: 張永江;辛言言;魏梅生;馬潔;朱水芳;李桂芬;李曼
• 申請（專利權）人: 中國檢驗檢疫科學研究院
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

1.檢測玉簪屬植物病毒X的環介導等溫擴增引物組，為引物組A或引物組B；所述引物組A由引物1、引物2、引物3、引物4、引物5和引物6組成；所述引物組B由所述引物1、所述引物2、所述引物3和所述引物4組成；

所述引物1、所述引物2、所述引物3、所述引物4、所述引物5和所述引物6的核苷酸序列分別為序列表中的序列1、序列2、序列3、序列4、序列5和序列6。

2.根據權利要求1所述的引物組，其特征在于：所述引物組A中所述引物1、所述引物2、所述引物3、所述引物4、所述引物5和所述引物6的摩爾比為1：1：8：8：4：4；所述引物組B中所述引物1、所述引物2、所述引物3和所述引物4的摩爾比為1：1：8：8。

3.檢測玉簪屬植物病毒X的環介導等溫擴增試劑或試劑盒，其特征在于：所述試劑或試劑盒含有權利要求1或2所述引物組。

4.根據權利要求3所述的試劑或試劑盒，其特征在于：所述試劑或試劑盒中還包括熒光顯色劑。

5.根據權利要求4所述的試劑或試劑盒，其特征在于：所述熒光顯色劑為鈣黃綠素。

6.權利要求1或2所述引物組、或權利要求3-5中任一所述的試劑或試劑盒在鑒定或輔助鑒定待測樣品中是否含有玉簪屬植物病毒X中的應用。

7.鑒定或輔助鑒定待測樣品中是否含有玉簪屬植物病毒X的方法，為如下（A）或（B）：

（A）包括如下（a1）和（a2）的步驟：

（a1）以從待測樣品中提取的總RNA為模板，用權利要求1或2所述引物組、或權利要求3-5中任一所述的試劑或試劑盒進行逆轉錄環介導等溫擴增；

（a2）根據步驟（a1）的擴增結果，按照如下方法確定所述待測樣品中是否含有玉簪屬植物病毒X：若所述待測樣品反應液出現白色沉淀物，則所述待測樣品中含有或候選含有玉簪屬植物病毒X；反之，則所述待測樣品不含或候選不含有玉簪屬植物病毒X；

（B）包括如下（b1）和（b2）的步驟：

（b1）以從待測樣品中提取的總RNA為模板，用權利要求5所述的試劑或試劑盒進行逆轉錄環介導等溫擴增；

（b2）根據步驟（b1）的擴增結果，按照如下方法確定所述待測樣品中是否含有玉簪屬植物病毒X：若所述待測樣品反應液為綠色，則所述待測樣品中含有或候選含有玉簪屬植物病毒X；若所述待測樣品反應液為橙色，則所述待測樣品中不含有或候選不含有玉簪屬植物病毒X。

8.根據權利要求6所述的應用，或權利要求7所述的方法，其特征在于：所述待測樣品為植物樣品或微生物樣品。

9.根據權利要求7或8所述的方法，其特征在于：所述逆轉錄環介導等溫擴增反應為63℃條件下的恒溫反應。