[發明專利]金屬硫蛋白轉基因酵母的構建及利用其制備重金屬生物吸附材料的方法有效
| 申請號: | 201310071946.2 | 申請日: | 2013-03-07 |
| 公開(公告)號: | CN103205454A | 公開(公告)日: | 2013-07-17 |
| 發明(設計)人: | 陳麗杰;王曉珊;袁文杰 | 申請(專利權)人: | 大連理工大學 |
| 主分類號: | C12N15/81 | 分類號: | C12N15/81;C12N1/19;C02F1/58;C12R1/865;C02F101/20 |
| 代理公司: | 大連理工大學專利中心 21200 | 代理人: | 梅洪玉 |
| 地址: | 116024*** | 國省代碼: | 遼寧;21 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 金屬 蛋白 轉基因 酵母 構建 利用 制備 重金屬 生物 吸附 材料 方法 | ||
1.一種金屬硫蛋白轉基因酵母的構建,其特征在于:將從釀酒酵母Saccharomyces?cerevisiae288c中克隆的金屬硫蛋白基因連接到pFA6a載體上,然后再將S.cerevisiae288c3‐磷酸甘油酸激酶基因(PGK1)啟動子拼接到載體上,最后將S.cerevisiae288c?rDNA基因作為同源臂連接到上述載體上,從而得到具有重金屬吸附功能的多拷貝整合表達載體pFA6a-PGK1-cup1-rDNA,將其線性化后轉化釀酒酵母S.cerevisiae4126細胞內,利用G418作為篩選標記,即可篩選到具有重金屬吸附功能的金屬硫蛋白轉基因酵母。
2.利用權利要求1所述的金屬硫蛋白轉基因酵母制備重金屬生物吸附材料的方法,其特征在于,將轉基因酵母菌在葡萄糖濃度為20g/L的YPD培養基中培養過夜,然后按照1:100的比例接種到葡糖糖濃度為60g/L的YPD培養基中培養36h后,抽濾收集菌體,用清水清洗3次,經過以上過程制備的菌體即為重金屬生物吸附材料。
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