[發明專利]檢測人巨細胞病毒或其啟動子的熒光絕對定量PCR試劑盒

無效

• 申請號: 201310070654.7
• 申請日: 2013-03-06
• 公開（公告）號: CN103215376A
• 公開（公告）日: 2013-07-24
• 發明（設計）人: 苗玉發;李波;沈連忠
• 申請（專利權）人: 中國食品藥品檢定研究院
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/68;C12R1/93
• 代理公司: 北京遠大卓悅知識產權代理事務所(普通合伙) 11369
• 代理人: 史霞

1.一種檢測人巨細胞病毒或檢測含人巨細胞病毒啟動子的基因治療產品的熒光定量PCR試劑盒，其特征在于，包括以下各組分：熒光聚合酶鏈式反應液，特異性引物對，熒光標記的探針和雙蒸水。

2.按照權利要求1所述的熒光定量PCR試劑盒，其特征在于：所述特異性引物對由SEQ?ID?No.1和SEQ?ID?No.2所示的引物組成；所述探針的核苷酸序列為SEQ?ID?No.3所示。

3.按照權利要求2所述的熒光定量PCR試劑盒，其特征在于：在探針的5′端標記有熒光報告基團；在探針的3′端標記有熒光淬滅基團。

4.按照權利要求3所述的熒光定量PCR試劑盒，其特征在于：所述的熒光報告基團包括FAM、HEX或ROX熒光報告基團；所述的熒光淬滅基團包括TAMRA、BHQ1或BHQ2熒光淬滅基團。

5.按照權利要求4所述的熒光定量PCR試劑盒，其特征在于：所述的熒光報告基團是FAM熒光報告基團；所述的熒光淬滅基團是TAMRA熒光淬滅基團。

6.按照權利要求1所述的熒光定量PCR試劑盒，其特征在于：所述的熒光聚合酶鏈式反應液包括：Taq?DNA聚合酶、PCR緩沖液、Mg²⁺、dNTPs。

7.按照權利要求1所述的熒光定量PCR試劑盒，其特征在于：含有人巨細胞病毒啟動子陽性質粒標準品。

8.權利要求1-7任何一項所述的熒光定量PCR試劑盒在制備檢測人巨細胞病毒試劑中的用途。

9.權利要求1-7任何一項所述的熒光定量PCR試劑盒在檢測含人巨細胞病毒啟動子的基因治療產品中的應用。

10.按照權利要求9所述的應用，其特征在于，包括：(1)建立PCR反應體系；(2)進行PCR擴增；(3)進行定性或定量分析；其中步驟(1)中所述的PCR反應體系為：總體積25μl，上/下游引物260nmol/L，探針100nmol/L，5×PCR緩沖液5μl，dNTP200μmol/L，Mg²⁺3mmol/L，Ex?Taq?HS聚合酶1.5U，待檢測的樣品模板1.5μl，滅菌水16μ1；所述上/下游引物的序列分別為SEQ?ID?No.1和SEQ?ID?No.2所示。