[發明專利]一種熒光定量檢測羥基自由基的方法

有效

• 申請號: 201310069048.3
• 申請日: 2013-03-05
• 公開（公告）號: CN103149188A
• 公開（公告）日: 2013-06-12
• 發明（設計）人: 張煊;司芳;閻克路
• 申請（專利權）人: 東華大學
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 上海天翔知識產權代理有限公司 31224
• 代理人: 呂伴

1.一種熒光定量檢測羥基自由基的方法，其特征是：所述方法的熒光探針為苯五甲酸，其分子結構式為

2.根據權利要求1所述的一種熒光定量檢測羥基自由基的方法，其特征在于，具體步驟為：將捕捉劑苯五甲酸加入待測體系中，使其摩爾濃度為羥基自由基產生物摩爾濃度的1倍及1倍以上；捕捉反應結束后調節待測體系pH為9～10；檢測待測體系的熒光強度，根據熒光強度與羥基苯五甲酸濃度的線性關系及羥基自由基與羥基苯五甲酸的一一對應關系，由熒光強度計算出此時待測體系中羥基自由基的產生量。

3.根據權利要求2所述的一種熒光定量檢測羥基自由基的方法，其特征在于，所述苯五甲酸加入待測體系中的摩爾濃度為羥基自由基產生物摩爾濃度的1～3倍。

4.根據權利要求2所述的一種熒光定量檢測羥基自由基的方法，其特征在于，所述待測體系中定量檢測的羥基自由基濃度范圍為0.00414～5.52μmol/L；

所述計算按照羥基自由基濃度與熒光強度的線性關系，為：

羥基自由基濃度為0.00414～0.4923μmol/L時，Y=353.68304X-0.02765；

羥基自由基濃度為0.4923～5.52μmol/L時，Y=204.17159X+79.88334；

其中Y為熒光強度；

X為羥基自由基濃度，單位為μmol/L。

5.根據權利要求2所述的一種熒光定量檢測羥基自由基的方法，其特征在于，所述待測體系的溫度范圍為20～98℃，pH≥5。

6.根據權利要求2所述的一種熒光定量檢測羥基自由基的方法，其特征在于，所述的檢測熒光強度是采用熒光分光光度計。

7.根據權利要求6所述的一種熒光定量檢測羥基自由基的方法，其特征在于，所述熒光分光光度計的型號為F-7000。

8.根據權利要求2所述的一種熒光定量檢測羥基自由基的方法，其特征在于，所述苯五甲酸溶于緩沖液或堿性溶液形成苯五甲酸溶液后加入到待測體系中。

9.根據權利要求8所述的一種熒光定量檢測羥基自由基的方法，其特征在于，所述的緩沖液為磷酸鹽或硼酸鹽溶液；所述堿性溶液為NaOH或KOH溶液。

10.根據權利要求8所述的一種熒光定量檢測羥基自由基的方法，其特征在于，所述的苯五甲酸溶液中苯五甲酸的濃度為10^-6～0.2mol/L。