[發明專利]WRKY轉錄因子多肽基因應用的載體和方法

有效

• 申請號: 201310058304.9
• 申請日: 2013-02-25
• 公開（公告）號: CN104004767B
• 公開（公告）日: 2020-04-14
• 發明（設計）人: 高陽;劉軍華;呂貴華;毛冠凡;王昌貴;王喜萍;夏勉;于昆
• 申請（專利權）人: 先鋒海外公司;北京凱拓迪恩生物技術研發中心有限責任公司
• 主分類號: C12N15/29
• 分類號: C12N15/29;C12N15/82;A01H5/00;A01H5/10;A01H1/02;A01H6/46;A01H6/20;C12Q1/6895
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 李慧惠;權陸軍

1.一種分離的多聚核苷酸，其特征為增加所述多聚核苷酸的表達提高植物的耐旱性，所述多聚核苷酸由以下組成：(a)序列表中SEQ ID NO：3所示的序列，(b)序列表中SEQ IDNO：4所示的序列，(c)編碼如序列表中SEQ ID NO：5所示的氨基酸序列多肽的核酸序列，或(d)上述核酸序列(a)、(b)或(c)全長互補的核酸序列。

2.根據權利要求1，所述多肽的氨基酸序列由序列表中SEQ ID NO：5組成。

3.根據權利要求1，所述核苷酸序列由序列表中SEQ ID NO：3組成。

4.根據權利要求1，所述核苷酸序列由序列表中SEQ ID NO：4組成。

5.一種重組DNA載體，所述重組DNA載體包括權利要求1中分離的核酸序列和至少一個調控序列。

6.一種獲得耐旱性提高的植物方法，包括獲得轉基因植物，所述獲得的植物的基因組中含有重組DNA載體，其中，重組DNA載體包括至少一個調控元件，和與之相連的多聚核苷酸；所述多聚核苷酸編碼的多肽的氨基酸序列為SEQ ID NO：5；與對照植物相比，所述獲得的植物顯示增強的耐旱性。

7.根據權利要求6所述的一種獲得耐旱性提高的植物方法，與對照植物相比，所述獲得的植物顯示增加的籽粒產量、生物量或兩者。

8.根據權利要求6或7所述的方法，與所述對照植物相比，在水分限制條件下，所述獲得的植物顯示所述增加的籽粒產量、生物量或兩者。

9.根據權利要求6或7所述的方法，所述獲得的植物收獲的種子的基因組中含有重組DNA載體，重組DNA載體包括至少一個調控元件，和與之相連多聚核苷酸；所述多聚核苷酸編碼的多肽的氨基酸序列為SEQ ID NO：5；與對照植物相比，由所述種子長出的植物顯示至少一個增加的性狀，所述性狀選自耐旱性、籽粒產量和生物量。

10.提高植物耐旱性的方法，其包括(a)將重組DNA載體轉入植物再生細胞，其中，重組DNA載體包括至少一個調控元件，和與之相連的多聚核苷酸，所述多聚核苷酸編碼的多肽的氨基酸序列為SEQ ID NO：5；(b)由步驟(a)的植物再生細胞再生轉基因植物，其中轉基因植物的基因組中含有重組DNA載體；(c)獲得步驟(b)轉基因植物的子代植物，其中所述子代植物的基因組中含有重組DNA載體，與對照植物相比，所述子代植物顯示增強的耐旱性。

11.改善植物耐旱性的方法，其包括(1)將權利要求6或7所獲得的任意植物與另一個植物進行雜交，產生的子代種子；(b)收獲和種植子代種子以獲得至少一個子代植株；(c)將子代植物與另一個植物品種雜交，產生至少一個回交子代種子；可選的，(d)多次重復步驟(b)和(c)，產生比所選植物品種具有更高耐旱性植物。

12.評價植物耐旱性的方法，其包括(a)獲得轉基因植物，其中，轉基因植物的基因組中含有重組DNA載體，所述的重組DNA載體包括至少一個調控元件，和與之相連的多聚核苷酸，所述多聚核苷酸編碼的多肽的氨基酸序列為SEQ ID NO：5；(b)獲得轉基因植物的子代植物，其中，子代植物的基因組中含有重組DNA載體；(c)以不含有所述重組DNA載體的植物為對照，評價子代植物的耐旱性；與對照植物相比，轉基因子代植物的耐旱性增加了。