[發明專利]重組蛋白PACAP38-NtA及其編碼基因與應用

有效

• 申請號: 201310057657.7
• 申請日: 2013-02-22
• 公開（公告）號: CN103145851A
• 公開（公告）日: 2013-06-12
• 發明（設計）人: 洪岸;吳陸生;陳小佳
• 申請（專利權）人: 暨南大學
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C07K1/22;C07K1/18;C12N15/62;C12N1/21;C12N15/70;C12P21/02;A61K38/17;A61K47/48;A61P27/02;C12R1/19
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 蘇運貞;陳燕嫻

技術領域

本發明涉及一種重組蛋白，特別涉及一種重組蛋白PACAP38-NtA及其編碼基因與應用。

背景技術

垂體腺苷酸環化酶激活多肽（Pituitary?Adenylate?Cyclase-activating?Polypeptide，PACAP）是Miyata等于1989年在研究下丘腦促垂體激素時發現的一種具有廣泛生物學活性的多肽，是促胰液素/高血糖素/血管活性腸肽(vasoaetive?intestinal?peptide，VlP)家族中的新成員。

PACAP在體內存在兩種形式，分別為含38個氨基酸的PACAP38和缺失羧基端11個氨基酸的截短肽PACAP27。PACAP38比PACAP27在組織中的含量更豐富，活性更高。PACAP及其受體不僅分布在中樞神經系統和周圍神經系統，而且在周圍組織和器官也廣泛分布，如胰腺、胰島、消化道、生殖腺等。PACAP主要有3種受體：PACIR、VPACIR和VPAC2R。PACIR是PACAP的特異性受體，受體VPACIR和VPAC2R是PACAP和VIP共同的受體。受體PACIR比VPACIR和VPAC2R在中樞神經系統的含量及分布多，3種受體在外周各臟器組織中均分布廣泛。鑒于其分布及生物學特性，大量實驗表明PAC1R在介導神經系統的發育和保護方面起重要作用。在眼部，PACAP及其受體主要分布在角膜、虹膜、睫狀神經節、脈絡膜和視網膜等處。

PACAP及其特異受體PACI在眼部分布廣泛，PACAP不僅有營養及修復神經作用，還促角膜上皮修復及參與調解眼表炎癥反應。因此對角膜瓣術后神經修復及角膜感覺功能恢復有重要促進作用，而僅用PACAP38作用于角膜及角膜神經，雖也具有一定的修復作用，但其使用量較大，修復時間較長。

發明內容

本發明的首要目的在于克服現有技術的缺點與不足，提供一種重組蛋白PACAP38-NtA。

本發明的另一目的在于提供編碼所述的重組蛋白PACAP38-NtA的基因。

本發明的再一目的在于提供表達所述的重組蛋白PACAP38-NtA的菌株及其發酵方法以及所述的重組蛋白PACAP38-NtA的純化方法。

本發明的目的通過下述技術方案實現：一種重組蛋白PACAP38-NtA，其氨基酸序列如下所示：

HSDGIFTDSYSRYRKQMAVKKYLAAVLGKRYKQRIKNKGSGGGSGGGGSGGGGSNCPERELQEEEEEANVVLTGTVEEIMNDVPVHHTYSCKVRVWRYLKGKDIVTHEILLDGGNKVVIGGFGDPLICDNQVSTGDTRIFFVNPAPQYMWPAHRNELMLNSSLMRITLRNLEEVEHCVEEHRKLLADKPNSYFTQTPPTP；

編碼所述的重組蛋白PACAP38-NtA的核苷酸序列如下所示：

CACTCTGACGGTATCTTCACCGACTCTTACTCTCGTTACCGTAAACAGATGGCTGTTAAAAAATACCTGGCTGCTGTTCTGGGTAAACGTTACAAACAGCGTATCAAAAACAAAGGTTCTGGTGGTGGTTCTGGTGGTGGTGGTTCTGGTGGTGGTGGTTCTAACTGCCCGGAACGTGAACTGCAGGAAGAAGAAGAAGAAGCTAACGTTGTTCTGACCGGTACCGTTGAAGAAATCATGAACGACGTTCCGGTTCACCACACCTACTCTTGCAAAGTTCGTGTTTGGCGTTACCTGAAAGGTAAAGACATCGTTACCCACGAAATCCTGCTGGACGGTGGTAACAAAGTTGTTATCGGTGGTTTCGGTGACCCGCTGATCTGCGACAACCAGGTTTCTACCGGTGACACCCGTATCTTCTTCGTTAACCCGGCTCCGCAGTACATGTGGCCGGCTCACCGTAACGAACTGATGCTGAACTCTTCTCTGATGCGTATCACCCTGCGTAACCTGGAAGAAGTTGAACACTGCGTTGAAGAACACCGTAAACTGCTGGCTGACAAACCGAACTCTTACTTCACCCAGACCCCGCCGACCCCG；