[發明專利]一種酶催化活化金銀花葉提取綠原酸的方法

有效

• 申請號: 201310057205.9
• 申請日: 2013-02-22
• 公開（公告）號: CN103086889A
• 公開（公告）日: 2013-05-08
• 發明（設計）人: 王星敏
• 申請（專利權）人: 王星敏
• 主分類號: C07C69/732
• 分類號: C07C69/732;C07C67/48
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于綠原酸提取技術領域，具體涉及酶催化活化金銀花葉提取綠原酸方法。

背景技術

綠原酸是由咖啡酸與奎尼酸形成的酯，屬于苯丙素類化合物，主要存于金銀花、杜仲、可可樹以及咖啡等植物中。綠原酸作為藥物合成的重要原料，對防治心血管系統疾病、糖尿病有顯著的療效，也廣泛應用與食品保鮮、化妝品中抗衰老以及預防肥預等方面，在醫藥及人口健康等領域具有廣闊的市場應用前景。但綠原酸本身具有不穩定性，從植物中提取的過程中，高溫、強光以及長時間加熱等條件可加速綠原酸水解以及分子內酯基遷移，發生綠原酸異構化。因此，研究綠原酸的提取方法，具有可觀的經濟價值和現實意義。

現有提取綠原酸的方法，如2012年3月28日公開的公開號為CN102391116A的“從金銀花葉中提取綠原酸的方法”，公開的方法是：以金銀花葉為原料，將金銀花葉粉碎后，三次浸泡后得提取液，提取液中加入澄清劑，攪拌后靜置10～14h，分離得含綠原酸的上層清液濾液，經大孔樹脂吸附、0.5～1倍樹脂體積量的純化水洗脫后，再用pH值為2～3的3倍樹脂體積量的食品級乙醇溶液(濃度為45～65％)洗脫得含綠原酸的洗脫液，于50℃濃縮、真空干燥后得綠原酸粉末，其綠原酸純度達35～95％。該方法的主要缺點是：(1)該方法采用直接浸泡金銀花葉、洗脫浸泡液后獲得綠原酸，因綠原酸在25℃時水中溶解度約為4％，常溫下金銀花葉中綠原酸溶于浸泡液的量少，導致金銀花葉中綠原酸資源浪費，直接影響產品的提取量，從而降低金銀花葉中綠原酸資源開發的經濟價值；(2)該方法先后經三次浸泡，純化水、乙醇兩次洗脫，生產步驟共7步，所得綠原酸提取純度介于35～95％之間，生產過程繁瑣增加生產工序和設備，從而增加生產成本，繁多的步驟導致綠原酸提取、純化工藝的不穩定，影響綠原酸產品品質，直接影響綠原酸產品經濟開發價值；(3)生產過程中，繁多的步驟中僅靜置需10～14h，且采用的洗脫劑乙醇為食品級，進一步增加了生產能耗和成本。

發明內容

本發明的目的是，針對現有提取綠原酸方法的不足，提供一種酶催化活化金銀花葉提取綠原酸的方法，具有提取條件常溫(壓)、操作步驟少且簡單、生產能耗和成本低、綠原酸溶浸充分且穩定、提取率和純度高、有機溶劑使用量減少等特點。

本發明的機理是：本發明以金銀花葉固體廢棄物為原料，選用工程酶(纖維素酶和木質素酶)作為催化活化木質纖維素的活化劑，通過木質素酶降解金銀花葉中桎梏纖維素的木質素，增加纖維素酶對纖維素的水解作用，有效打斷阻礙綠原酸溶出的金銀花葉植物纖維組織，提高植物組織通透性，減小綠原酸傳質阻力，增大綠原酸提取率。采用酶活化處理金銀花葉植物組織，避免高溫、強光及長時間加熱等條件破壞綠原酸穩定性，提高綠原酸提取率及產品品質；同時，減少預處理金銀花葉的化學活化劑酸、堿以及浸提綠原酸的有機溶劑的使用量，減少了生產安全隱患，避免酸堿使用加大對環境造成的二次污染，有利于環境保護，實現金銀花葉的資源化再利用。

實現發明目的的技術方案是：一種酶催化活化金銀花葉提取綠原酸的方法，以金銀花葉固體廢物為原料，經原料處理、酶解反應、超聲波協同浸提、綠原酸制備的簡單工藝而得到產品。所述方法的具體步驟如下：

(1)原料處理

以金銀花葉固體廢棄物為原料。先將原料用水清洗干凈后，放置于烘箱中，先在85～110℃的烘箱中烘30～90min，再經粉碎機粉碎后、并過20～160目篩，未過篩的原料返回粉碎機中再粉碎，收集過篩原料(即為處理后的原料)。

(2)酶解反應

第(1)步驟完成后，先按照第(1)步處理后的原料的質量(g)∶酶的質量(g)∶水的體積(ml)之比為1∶0.05～0.3∶5～30的比例，在第(1)步預處理后的原料中，加入酶及水，攪拌均勻后，再用硫酸或氫氧化鈉溶液調節體系的pH值為3～8，然后將調節pH值后的混合液放置于搖床中，在水浴溫度為20～65℃下進行酶解活化2～14h，用抽濾泵進行抽濾，分別收集濾液和濾渣。收集的濾渣為金銀花葉酶解活化基料，收集的濾液處理達標后排放。所述的酶為纖維素酶或木質素酶或纖維素酶和木質素酶復配酶，所述的復配酶為木質素酶∶纖維素酶的質量比為1∶0.5～3。

(3)超聲波協同浸提