[發明專利]一種同時高效制備金針菇多糖和蛋白的方法無效

申請號：	201310055112.2	申請日：	2013-02-21
公開（公告）號：	CN103113487A	公開（公告）日：	2013-05-22
發明（設計）人：	賀偉強	申請（專利權）人：	嘉興職業技術學院
主分類號：	C08B37/00	分類號：	C08B37/00;C07K1/14
代理公司：	深圳市千納專利代理有限公司 44218	代理人：	強紅剛;唐立平
地址：	浙江省嘉興市場***	國省代碼：	浙江;33
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摘要：
搜索關鍵詞：	一種同時高效制備金針菇多糖蛋白方法
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【說明書】：

技術領域

本發明屬于食用菌有效成份提取分離技術領域，具體而言，涉及一種同時高效制備金針菇多糖和蛋白的方法。

背景技術

金針菇(Flammulina?velutipes)又名樸菇，冬菇，隸屬真菌門，擔子菌綱，傘菌目，口蘑科，金針菌屬。金針菇營養極為豐富，有增智菇和“一休菇”等美稱，是世界上著名的食用菌，目前已發展成為第三大食用菌。金針菇清嫩爽口，鮮美味香，營養豐富，是一道極為高檔的佳肴，具有較高的營養價值。文獻報道，金針菇中含較高的蛋白質、碳水化合物和粗纖維，而脂肪含量較低，是一種不可多得的高營養食品。

目前，在金針菇所含的生物活性成份中，國內外對金針菇多糖的研究報到比較多，開發利用也比較深入，而對其他活性成分的研究開發比較少。對金針菇多糖的制備主要是水提，醇沉，然后利用Sevage?法，三氯醋酸沉淀蛋白或蛋白酶水解的方法來去除蛋白，在制備金針菇多糖這種單一成份時，金針菇蛋白都白白的丟棄，不僅導致提取成本的提高，而且浪費了大量的金針菇資源。

雙水相萃取技術始于20世紀60年代，由于雙水相萃取條件溫和，容易放大，可連續操作，因此該技術已成功地應用于蛋白質、核酸和病毒等生物產品的分離和純化，也有抗生素，中藥有效成份等小分子分離方面的嘗試(食品工業科技，2012，33:?191-194；食品科學，2009，30:110-113；沈陽藥科大學學報，2012，4:?302-305；中藥材，2009，11:?1754-1757)。離子液體是一類室溫或相近溫度下完全由離子組成的有機液體化合物，離子液體一般由有機陽離子和無機或有機陰離子組成。離子液體與目前廣泛應用的有機熔劑相比，具有以下獨特優點：蒸汽壓低，不易揮發；具有較強的化學穩定性；具有較大的結構可調性；具有介質和催化雙重功能；具有較好的導電性、熱穩定性和抗氧化性等。離子液體可與多種物質如鹽、糖、表面活性劑等形成雙水相體系，其在萃取分離生物物質方面表現出優異的性能，這無疑會開拓一種新的綠色分離技術?，F有技術對雙水相體系用于活性成分提取分離的報道比較多，但是利用離子液體/鹽雙水相的報道比較少。公開號為CN101164905A的專利文獻利用離子液體-鹽雙水相體系萃取回收水溶液中的芳香類化合物；公開號為CN102267933A的專利文獻利用離子液體-雙水相體系萃取氨基酸；公開號為CN102796163A的專利文獻利用離子液體提取分離豆粕中的蛋白質；以上技術都取得了較好的提取分離效果。然而，利用離子液體/鹽雙水相來同時制備金針菇多糖和蛋白的技術卻沒有文獻報道。

發明內容

針對現有技術提取金針菇多糖時的提取率低及不能同時制備蛋白成份導致浪費的缺陷，本發明目的在于提供一種能從金針菇中同時高效、綠色、低成本地制備多糖和蛋白的方法。

本發明目的通過以下技術方案來實現：

一種同時高效制備金針菇多糖和蛋白的方法，該方法包括以下步驟：

（1）原料預處理：干燥金針菇子實體經粉碎后，與蒸餾水按1：30-50的重量比混合成混合液后，備用；

（2）酶解處理：取占混合液重量0.05-0.2％的纖維素酶加入混合液中，調解pH值至4-6，振蕩或攪拌下于45-55℃酶解30-90分鐘；

（3）微波輔助萃?。簩⒉襟E（2）所得酶解液進行微波處理5-20分鐘后，離心，得上清液和沉淀物；

（4）醇沉多糖：將步驟（3）所得上清液減壓濃縮，加入2-4倍體積的無水乙醇進行醇沉后，離心，冷凍高燥后得金針菇粗多糖；

（5）雙水相萃取：將金針菇粗多糖溶于水，得粗多糖溶液，加入離子液體/鹽雙水相體系中，在溫度30-50℃、pH?4-7的條件下震蕩30-50分鐘，震蕩速度為100-200r·min^-1，然后靜置20-40分鐘分層；

（6）金針菇多糖的制備：取出富含無機鹽的下層，用截留量為6000的超濾膜除鹽，濃縮，冷凍干燥得金針菇多糖；

（7）金針菇蛋白的制備：取出富含離子液體的上層，加入二氯甲烷進行萃取，取有機相真空旋轉干燥去除二氯甲烷，得金針菇蛋白。

優選地，上述方法的步驟（2）中微波處理的條件為50-100H_Z，300-800W。