[發明專利]板式化學發光免疫診斷試劑通用固相包被板及其制備方法

無效

• 申請號: 201310055070.2
• 申請日: 2013-02-21
• 公開（公告）號: CN104007102A
• 公開（公告）日: 2014-08-27
• 發明（設計）人: 林斯
• 申請（專利權）人: 林斯
• 主分類號: G01N21/76
• 分類號: G01N21/76;G01N33/68;G01N33/543;G01N33/533
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種板式化學發光免疫診斷試劑通用固相包被板的制備方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟：

步驟1：取0.5～1.5mg分子量66KDa的鏈親和素和2.0～2.8mg分子量160KDa的抗熒光素抗體溶解于0.05～0.15ml、0.05M、pH9.6的碳酸緩沖液中，加入攪拌子備用；

步驟2：取70％的戊二醛0.05～0.15ml用蒸餾水稀釋70倍成0.5～1.5％濃度備用；

步驟3：在步驟1制得的溶液中加入新鮮配制的1％戊二醛溶液0.05～0.15ml，室溫攪拌1小時。取出反應液加入透析袋，對0.05M、pH9.6的碳酸緩沖液透析過夜，期間換液3次；要求透析袋透過直徑為160KDa；將透析后的反應液加入等量甘油保存于-15～25℃；

步驟4：將新合成的包被蛋白甘油溶液用0.05M、pH9.6的碳酸緩沖液稀釋到1∶1000，在96孔化學發光板中每孔加入50～150μl稀釋溶液，3～5℃靜置過夜；次日將板子拍桿，加入含有1％牛血清白蛋白的溶液150～250μl，37℃封閉反應0.5～1.5小時；將板子再次拍干，置于烘干間抽濕烘干后真空包裝，得到板式化學發光免疫診斷試劑通用固相包被板。

2.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，在步驟1中，取1mg分子的鏈親和素和2.4mg的抗熒光素抗體溶解于0.1ml的碳酸緩沖液中。

3.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，在步驟2中，取戊二醛0.1ml稀釋成1％濃度備用。

4.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，在步驟3中，加入戊二醛溶液0.1ml。

5.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，在步驟3中，將透析后的反應液加入等量甘油保存于-20℃。

6.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，在步驟4中，在化學發光板中每孔加入100μl稀釋溶液，4℃靜置過夜。

7.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，在步驟4中，加入含有1％牛血清白蛋白的溶液200μl，37℃封閉反應1小時。

8.一種板式化學發光免疫診斷試劑通用固相包被板的制備方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟：

步驟1：取1mg分子量66KDa的鏈親和素和2.4mg分子量160KDa的抗熒光素抗體溶解于0.1ml、0.05M、pH9.6的碳酸緩沖液中，加入攪拌子備用；

步驟2：取70％的戊二醛0.1ml用蒸餾水稀釋70倍成1％濃度備用；

步驟3：在步驟1制得的溶液中加入新鮮配制的1％戊二醛溶液0.1ml，室溫攪拌1小時。取出反應液加入透析袋，對0.05M?pH9.6的碳酸緩沖液透析過夜，期間換液3次；要求透析袋透過直徑為160KDa；將透析后的反應液加入等量甘油保存于-20℃；.

步驟4：將新合成的包被蛋白甘油溶液用0.05M?pH9.6的碳酸緩沖液稀釋到1：1000；在96孔化學發光板中每孔加入100μl，4℃靜置過夜；次日將板子拍桿，加入含有1％牛血清白蛋白的溶液200μl，37℃封閉反應1小時；將板子再次拍干，置于烘干間抽濕烘干后真空包裝，得到板式化學發光免疫診斷試劑通用固相包被板。

9.一種板式化學發光免疫診斷試劑通用固相包被板，其特征在于，根據權利要求1或8所述的方法制備。

10.一種板式化學發光免疫診斷試劑盒，其特征在于，包括權利要求9所述的包被板。