[發明專利]一種快速測定脂肪酸含量的熒光方法

有效

• 申請號: 201310053970.3
• 申請日: 2013-02-21
• 公開（公告）號: CN103149187A
• 公開（公告）日: 2013-06-12
• 發明（設計）人: 周鵬;劉小鳴;彼得·恩塔卡薩內;張燕萍;梁麗
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 北京同恒源知識產權代理有限公司 11275
• 代理人: 張水俤

技術領域

本發明涉及一種全新的無損檢測方法，特別的，本發明涉及一種可以直接、快速地測定油脂中的脂肪酸含量的方法。

背景技術

現有測定食品脂肪酸組成的方法比較繁瑣且測試費用昂貴，這些限制使得這些方法不能應用于大批量樣品的檢測。例如目前最常應用的色譜法需要冗長的預處理步驟，通過皂化、酯化將脂肪酸轉化成脂肪酸甲酯(FAMEs)之后才能進行測定。

相反，波譜法能夠將所有的信息整合在一張圖譜上，并且通常不需要繁雜的前處理過程。最近，已有許多波譜應用于化學，藥物，農產品，生命科學和環境分析領域的報道，但是這些技術在工業上應用的可行性及其研究更有效的方法卻沒有得到很多的關注。而一些復雜精密的電學，光學設備的和化學計量學技術的聯用使得波譜技術在生物學領域，能夠很好處理從樣品中得來的波譜和化學信息。

熒光光譜法作為一種快速的篩選方法被用于檢測天然橄欖油中的熒光物質。它被用來表征和辨別食用油，測定它們的熱氧化和光氧化；除此之外熒光法還被用于檢測區分不同組分和產地的牛奶。而用熒光光譜法來測定食用油中脂肪酸組成的研究沒有報道過。

發明內容

針對上述情況，本發明的目的是提供一種全新的無損檢測方法，一種基于熒光光譜法和化學計量學結合的快捷簡便地測定食用油中脂肪酸含量的方法。

本發明通過以下方案實施：

一種快速測定脂肪酸含量的熒光方法，包括以下步驟：

（1）取樣：將固體樣品置于兩個石英片間，或者將液體樣品置于石英比色皿中；

（2）樣品的熒光測定：對樣品進行熒光掃描，采集其二維熒光光譜；

（3）建立模型：采用化學計量學方法構建熒光光譜數據和油脂脂肪酸含量的回歸模型；

（4）模型的驗證：采用內部交叉驗證的方法，作測定值和預測值間的相關性分析和顯著性分析，驗證模型；

（5）脂肪酸含量測定：按照步驟（1）的方法取待測樣品，按照步驟（2）的方法進行樣品的熒光測定，將熒光數據代入回歸模型，獲得脂肪酸含量。

所述的固體樣品為黃油，取樣方法是用空心鐵管采樣器取25mm直徑（10mm厚）的黃油置于兩個石英片之間測定熒光；液體樣品為植物油，直接倒入于石英比色皿中測定。

所述的油脂測定過程中不包含任何化學反應步驟，屬無損檢測。

所述的步驟（2）中樣品的熒光光譜測定的采集方式和采集條件為：激發波長設為295nm，發射波長范圍為300~500nm，激發和發射的狹縫寬度分別為5nm和2.5nm。

所述的熒光測定采用前表面熒光技術，采用發射光角度為56°，以減小反射光，散射光和偏振光的干擾。

所述的步驟（3）中油脂脂肪酸含量用氣相色譜方法測定。

所述的采用的化學計量學方法為偏最小二乘法（PLS），偏最小二乘法（PLS）用于樣品熒光光譜數據和脂肪酸含量的回歸計算。

所述的模型的驗證采用SPSS軟件內部交叉驗證，圖基檢驗（Tukey’s?test）用于樣品脂肪酸含量和熒光光譜法測定值的顯著性分析，p<0.05，t檢驗用來檢驗脂肪酸含量和熒光光譜法測定值的相關性。

本發明的有益效果：（1）熒光光譜數據與氣相色譜測得的脂肪酸含量有很強的相關性，通過對未知樣品測定其熒光光譜用所建立的回歸模型可以用于快速測定未知樣品脂肪酸含量的測定；（2）油脂測定過程中不包含任何化學反應步驟，屬無損檢測。

附圖說明

圖1為黃油和植物油的二維熒光光譜的發射光譜。

具體實施方式

下面結合實施例，進一步闡述本發明：

1、樣品的熒光光譜采集：在室溫下，用熒光光譜儀（日立F-7000熒光光譜儀）對樣品進行二維熒光光譜掃描。黃油樣品用取空心鐵管采樣器取直徑25mm、厚度10mm的黃油置于兩個石英片之間測定其熒光，而植物油樣品則加入石英比色皿中進行測定。熒光測定采用前表面熒光技術，發射光角度選為56°以減小反射光，散射光和偏振光的干擾。二維熒光發射光譜（維生素E）采集的參數為：激發波長設為295nm，發射波長范圍為300~500nm。激發和發射的狹縫寬度分別為5nm和2.5nm。每個對樣品做兩個平行測定，每個進行三次掃描。