[發明專利]從連翹葉中復合提取連翹苷、連翹酯苷A和蘆丁的方法

有效

• 申請號: 201310052192.6
• 申請日: 2013-02-18
• 公開（公告）號: CN103102375A
• 公開（公告）日: 2013-05-15
• 發明（設計）人: 楊建雄;李忠岐;劉偉霞;顏禮有
• 申請（專利權）人: 陜西師范大學
• 主分類號: C07H15/26
• 分類號: C07H15/26;C07H15/18;C07H17/07;C07H1/08
• 代理公司: 西安永生專利代理有限責任公司 61201
• 代理人: 申忠才

技術領域

本發明涉及一種屬于連翹葉分離技術領域，特別是一種從天然植物連翹葉中連續提取有效成分連翹酯苷A、連翹苷和蘆丁的方法。

背景技術

連翹為木犀科連翹屬落葉灌木，是常用藥材，傳統以果實入藥，但民間調查顯示，連翹葉有消除便秘，預防感冒，降血脂，降血壓等作用。國內己有研究者對連翹葉的化學成分進行了初步分析，并利用連翹葉制成茶葉作為滋補調理飲料應用。連翹葉常作為保健茶使用，化學研究證明，連翹葉與常用藥材連翹果實的化學成分有較好一致性，主要含有木質素類、苯丙素苷類、三萜酸類、黃酮類和揮發油類等，并且葉子中的有效生物活性成分如連翹苷、連翹酯苷的含量遠高于連翹果實。

連翹苷和連翹酯苷A是國家藥典2010年版規定的連翹質量控制指標成分。連翹苷有較好的抗菌、降血脂和減肥作用；連翹酯苷有較好的抗病毒和抗氧化作用，對金黃色葡萄球菌等多種致病菌具有抑制作用，還能抑制磷酸二酯酶、真菌以及活性氧；蘆丁具有抗炎、抗病毒、抗氧化、降低毛細血管脆性和通透性等作用。三者在醫藥和食品領域作為天然藥物、天然防腐劑、天然抗氧化劑均具有很廣泛的應用前景。

目前各種文獻資料中，從連翹果實或連翹葉中只單獨提取一種活性成分或者兩種，沒有合理利用連翹資源，造成資源的嚴重浪費。如中國專利200610148179.0，200810176773.X，201010235729.9等都是針對一種活性成分進行工藝研究，中國專利201110209731.3公開了一種從連翹葉提取連翹苷和連翹酯苷A的方法，其先通過熱水提取，沉淀分離，再用有機溶劑萃取，乙醇重結晶等制備連翹苷和連翹酯苷A，但耗時太長，得率比較低，而且大量蘆丁被丟棄。現有技術采用的方法直接水提或水提后有機溶劑萃取，或堿水提取，或酸水提取，沒有綜合考慮其他活性物質的活性，而且操作復雜，成本較高。目前尚未見到從連翹葉中同時提取分離連翹苷、連翹酯苷A和蘆丁的相關報道。

發明內容

為了解決現有技術中提取分離連翹苷、連翹酯苷A所存在的技術問題，本發明提供了一種方法簡單，原料利用率高、可從連翹葉中連續提取分離出連翹苷、連翹酯苷A和蘆丁的方法。

解決上述技術問題所采用的技術方案是由以下步驟組成：

（1）提取

將連翹葉粉碎至40～60目，60～75℃用體積濃度為55%的乙醇浸提40～60分鐘，每1g連翹葉對應添加15～40mL的乙醇，優選20～30mL，提取2～3次，合并浸提液，靜置，過濾，50～60℃減壓濃縮回收乙醇，按照每100mL濃縮液中添加3～6mL的量向濃縮液中添加無水乙醇，優選4～5mL，室溫靜置，過濾，得到連翹葉提取液；

（2）樹脂分離

將連翹葉提取液用大孔吸附樹脂吸附，連翹葉與大孔吸附樹脂的質量比為1：1.6～2，優選1：1.8，水洗雜質，用體積濃度為30%的乙醇洗脫，洗脫流速為1～3BV/h，洗脫體積為5～8BV，得到餾分Ⅰ，用濃度為50%的乙醇洗脫，洗脫流速為1～3BV/h，洗脫體積為5～8BV，得到餾分Ⅱ；

（3）沉淀分離

將餾分Ⅰ減壓濃縮回收乙醇，室溫靜置至沉淀物與水分離，得到沉淀物為蘆丁粗品，水層為連翹酯苷A粗提液，用水飽和的正丁醇萃取1～3次，回收正丁醇，余液干燥，得到連翹酯苷A粗品；將餾分Ⅱ減壓濃縮回收乙醇，室溫靜置，分離沉淀，得到連翹苷粗品；

（4）純化

將步驟（3）中所得的連翹苷粗品和蘆丁粗品分別用無水乙醇重結晶2～4次，干燥，分別得到連翹苷和蘆丁；將連翹酯苷A粗品用體積濃度為30%的甲醇溶解，用C18反相硅膠柱層析分離，體積濃度為30%的甲醇平衡，體積濃度為40%的甲醇洗脫，35～40℃減壓濃縮回收甲醇，余液冷凍干燥，得連翹酯苷A。

上述大孔吸附樹脂的型號是AB-8或D101。

上述步驟（4）中將連翹苷粗品和蘆丁粗品分別用無水乙醇重結晶2～4次，干燥，分別得到連翹苷和蘆丁；將連翹酯苷A粗品用體積濃度為30%的甲醇溶解，用C18反相硅膠柱層析分離，3倍柱床體積的濃度為30%的甲醇平衡，體積濃度為40%的甲醇洗脫，35～40℃減壓濃縮回收甲醇，冷凍干燥，得連翹酯苷A。