[發明專利]從胎盤和臍帶中同時提取和純化多種來源干細胞的方法

無效

• 申請號: 201310050738.4
• 申請日: 2013-02-08
• 公開（公告）號: CN103320382A
• 公開（公告）日: 2013-09-25
• 發明（設計）人: 周勝利;胡當玉;周凝;徐統樂;胡曉辰
• 申請（專利權）人: 周勝利
• 主分類號: C12N5/0735
• 分類號: C12N5/0735;C12N5/0775;C12N5/0789
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技術領域

本發明涉及一種從胎盤和臍帶中提取和純化干細胞的方法，尤其是一種從胎盤和臍帶中同時提取和純化多種來源干細胞的方法。?

背景技術

在二十世紀九十年代的今天，隨著醫學水平的提高，許多惡性傳染性疾病、營養不良性疾病逐步減少，甚至走向消失。而以惡性腫瘤、遺傳性疾病、免疫系統疾病正日益成為累及面廣、危害深且難以根治的主要疾病。如我國惡性腫瘤的年發病人數為160萬，且有逐年增加的趨勢；其主要治療方法為手術、放療、化療，盡管隨著這些方法的改進，惡性腫瘤的長期生存率有所提高，但大多數患者仍往往因復發或轉移而死亡，其死亡率占各類疾病的第一位或第二位。因此對上述疾病的攻克是我國醫學實踐中急需解決的課題，具有遠大的社會意義。干細胞移植是治療這些疾病的非常重要的方法之一，而臍帶血含有豐富的干細胞，是在干細胞中很有發展前途的細胞。?

造血干細胞能生成各類血細胞，少量的造血干細胞即可重建人體的全部血液免疫細胞成分，包括紅細胞、粒細胞，淋巴細胞，單核細胞、血小板。成人的造血干細胞主要存在于骨髓，這是主要的造血器官。采用功能正常的造血干細胞去恢復、重建或置換患者骨髓的?造血功能稱為造血干細胞移植。長期以來，主要采用骨髓細胞來做造血干細胞移植，故常稱為骨髓移植。研究發現，用多種方法可將骨髓中的造血干細胞動員入外周血，因而可用外周血干細胞作移植，其優點為：可避免供者采集骨髓時的痛苦，減少腫瘤細胞對造血干細胞的污染。?

根據造血干細胞的來源可將造血干細胞移植分為自體造血干細胞移植及異體造血干細胞移植，后者又可分為有血緣關系的造血干細胞移植及無血緣關系(無關供者〕的造血干細胞移植。顧名思義，用自己的造血干細胞作移植稱為自體造血干細胞移植，可治療多種惡性腫瘤。但不能治療遺傳病、造血免疫系統衰竭，治療惡性腫瘤的復發率也高于異體造血干細胞移植。用別人的造血干細胞作移植稱為異體造血干細胞移植，可治療多種惡性腫瘤、遺傳性造血免疫系統疾病、造血免疫系統衰竭、治療惡性腫瘤性疾病的復發率較低。但是異體造血干細胞供者越來越缺乏。因為異體造血干細胞移植需要人類組織相容抗原(HLA〕與患者相合的正常人提供造血干細胞，HLA不合的造血干細胞移植可引起嚴重的，甚至致命的副作用，稱為GVHD。同胞之間HLA配型相合的概率最高，為25％，由于子女的基因各有一半來自父母，父母與子女之間的HLA配型不能達到完全相合。人類有上萬種以上不同的HLA亞型，因此如要在無關人群中為一患者尋找HLA相合的供者，需要有數以十萬名以上的供者庫。在十多年前開展的臍帶庫，提供的臍帶血含有豐富的干細胞，臨床證明可以用于30公斤以下的兒童造血干細胞移植，是一種很有發展前途的干細?胞，可是臍帶血最大的不足就是所含造血干細胞量太少，僅能用于兒童患者。因此，急需解決造血干細胞的新來源問題。?

干細胞是具有自我復制和向各種細胞分化潛能的原始細胞，是形成生命機體各組織器官的起源細胞。人類個體的發育過程實際實質就是干細胞的自我更新和增殖分化的過程，而各個器官的細胞也是分別來源于各個器官的干細胞，像肝臟，神經，腦組織，胰腺，皮膚等。?

胚胎干細胞是最原始，可分化程度最高的細胞，也是受精卵結合后形成胚胎的初始階段，它可以分化成各種細胞，甚至可以采取核移植的方法，利用自體體細胞分化成各種細胞。臨床應用時必須破壞胚胎，讓其分化成其它細胞，由于細胞的高度分化性，易形成腫瘤細胞。?

成體干細胞是人出生以后，各器官還自行保留能再生的細胞。這種干細胞是越年輕的機體，含量越豐富，可分化程度越高。1998年，在美國Wisconsin大學首先發現在成人骨髓中也具有能分化成各種細胞的干細胞，隨后人們認識到人體內各種組織細胞都存在著這種細胞，稱為成人干細胞(ASC細胞)，它具有和胚胎干細胞同樣的功能。?

成人骨髓干細胞主要是含有能分化成人體血液細胞的干細胞，像白細胞，紅細胞，血小板等，也稱為造血干細胞。?

周圍血干細胞，正常人周圍血內含有很少量的干細胞，但是在應用了一種稱為白細胞刺激因子的藥物后，骨髓血中的干細胞可以釋?放到周圍血中，所以也稱為周圍動員血干細胞。?

轉基因多能干細胞，也稱為induced?pluripotent?stem(iPS)是由日本科學家(獲得2012年諾貝爾獎)首先發現的自體成體細胞在基因轉染后具有胚胎干細胞的功能，但最大疑問就是轉染細胞也同時具有腫瘤細胞的可能性，要應用于臨床，還有距離。?