[發明專利]果糖賴氨酸的制備方法

有效

• 申請號: 201310047017.8
• 申請日: 2013-02-06
• 公開（公告）號: CN103113428A
• 公開（公告）日: 2013-05-22
• 發明（設計）人: 鄒炳德;鄒繼華;陸慧賢;周海濱
• 申請（專利權）人: 寧波美康生物科技股份有限公司
• 主分類號: C07H15/12
• 分類號: C07H15/12;C07H1/00;G01N21/78
• 代理公司: 寧波市鄞州甬致專利代理事務所(普通合伙) 33228
• 代理人: 代忠炯

1.一種果糖賴氨酸的制備方法，其特征在于：包括以下制備步驟：

（1）以1~10重量份的賴氨酸α-NH₂衍生物、10~100重量份的D-葡萄糖為原料，80~800重量份醇溶液為溶劑，放入反應容器中，設定反應溫度為40~90℃進行回流反應；

（2）反應經1~10h后，停止加熱，冷卻；

（3）將冷卻后的反應液控制真空度為-0.01~-0.09MPa、溫度為30~50℃進行減壓蒸干，得到干物質，在所得的干物質中加入20~150重量份純水，待溶解后得溶液；

（4）將步驟（3）的溶液以0.1~5mL/min的流速泵入到強酸性陽離子交換樹脂層析柱中，完畢后，先用純水以1~8mL/min流速洗脫，當所得洗脫液與葡萄糖檢測試劑反應不顯色時，開始改用0.01~3mol/L、pH3~6的吡啶甲酸鹽或吡啶乙酸鹽洗脫，當所得洗脫液與底物檢測試劑反應顯色時，開始收集洗脫液，直至所得洗脫液與底物檢測試劑反應不顯色或顏色極淺為止；

（5）將步驟（4）收集的洗脫液進行冷凍干燥，得到固體物質并將其溶于1~2mol/L鹽酸溶液中，室溫放置過夜；

（6）將步驟（5）放置過夜的試液冷凍干燥，得到固體物質并以1:0.5~10重量比溶于甲醇或乙醚中，在0~10℃下放置，析出白色固形物，過濾，經冷凍干燥后所得的白色固體物質即為果糖賴氨酸。

2.根據權利要求1所述的果糖賴氨酸的制備方法，其特征在于：所述的賴氨酸α-NH2衍生物為Nα-芐氧羰基-L-賴氨酸，Nα-叔丁氧羰基-L-賴氨酸，Nα-芴甲氧羰基-L-賴氨酸，Nα-馬尿酰基-L-賴氨酸，Nα-甲酰基-L-賴氨酸，Nα-甲酰基-L-賴氨酸中的一種。

3.根據權利要求1所述的果糖賴氨酸的制備方法，其特征在于：所述的醇溶液為無水甲醇溶液或無水乙醇溶液。

4.根據權利要求1所述的果糖賴氨酸的制備方法，其特征在于：所述的葡萄糖檢測試劑的配方：緩沖液0.01~1mol/L，pH5~8.5，葡萄糖氧化酶1~16KU/L，過氧化氫的顯色系統；過氧化氫的顯色系統包括：過氧化物酶0.5~10KU/L，色原0.2~10mmol/L和成色劑0.2~10mmol/L。

5.根據權利要求1所述的果糖賴氨酸的制備方法，其特征在于：所述的底物檢測試劑的配方：緩沖液20~200mmol/L，pH5~8.5果糖賴氨酸氧化酶0.3~10KU/L，過氧化氫的顯色系統，過氧化氫的顯色系統包括：過氧化物酶0.5~10KU/L，色原0.2~10mmol/L和成色劑0.2~10mmol/L。

6.根據權利要求4或5所述的果糖賴氨酸的制備方法，其特征在于：所述的緩沖液為磷酸鹽緩沖液，乙酸-乙酸鈉緩沖液，三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽緩沖液，甘氨酸-鹽酸緩沖液中的一種。

7.根據權利要求6所述的果糖賴氨酸的制備方法，其特征在于：所述的緩沖液為磷酸鹽緩沖液或三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽緩沖液。

8.根據權利要求4或5所述的果糖賴氨酸的制備方法，其特征在于：所述的色原為N-乙基-N-(2-羥基-3-磺丙基)-3-甲基苯胺鈉鹽，N-乙基-N-(3-磺丙基)-3-甲基苯胺鈉鹽,N,N-雙(4-磺丁基)-3-甲基苯胺二鈉鹽中的一種。

9.根據權利要求4或5所述的果糖賴氨酸的制備方法，其特征在于：所述的成色劑為4-氨基安替比林，3-甲基-2-苯并噻唑啉酮腙鹽酸鹽水合物中的一種。

10.根據權利要求1所述的果糖賴氨酸的制備方法，其特征在于：所述的吡啶乙酸鹽為4-吡啶乙酸鹽、2-吡啶乙酸鹽或3-吡啶乙酸鹽；所述的吡啶甲酸鹽為4-吡啶甲酸鹽、2-吡啶甲酸鹽或3-吡啶甲酸鹽。