[發明專利]與PD-1和VEGF高效結合的融合蛋白、其編碼序列及用途

有效

• 申請號: 201310046985.7
• 申請日: 2013-02-06
• 公開（公告）號: CN103965363B
• 公開（公告）日: 2021-01-15
• 發明（設計）人: 錢其軍;金華君;王倩;丁娜;嚴巧靈;劉輝;俞德超;李林芳;吳孟超
• 申請（專利權）人: 上海白澤生物科技有限公司;上海細胞治療集團有限公司
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/62;C12N15/63;C12N1/21;C12N1/15;C12N5/10;A61K38/17;A61K48/00;A61P35/00;A61P35/04
• 代理公司: 中國貿促會專利商標事務所有限公司 11038
• 代理人: 劉海羅

1.一種分離的融合蛋白，其由如下肽段組成：

1)人類PD-L2的胞外區肽段；

2)人類FLT-1胞外區第2個免疫球蛋白樣結構域的肽段或/和KDR胞外區第3個免疫球蛋白樣結構域的肽段；以及

3)人類免疫球蛋白的Fc段；

其中：

所述人類PD-L2的胞外區肽段的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示；

所述人類FLT-1胞外區第2個免疫球蛋白樣結構域的肽段的氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示；

所述人類KDR胞外區第3個免疫球蛋白樣結構域的肽段的氨基酸序列如SEQ ID NO：5所示；

所述的Fc段不具有ADCC效應；

相對于1)和2)中所述的肽段，所述Fc段位于融合蛋白的靠近C末端的一側；

所述人類PD-L2的胞外區肽段、人類FLT-1胞外區第2個免疫球蛋白樣結構域的肽段和KDR胞外區第3個免疫球蛋白樣結構域的肽段分別獨立地為一個或兩個拷貝。

2.根據權利要求1所述的融合蛋白，其特征在于如下的(1)－(4)中的任一項或者多項：

(1)所述人類免疫球蛋白Fc段選自人類免疫球蛋白IgG各亞型、IgM或者IgA的全長Fc段；

(2)當為兩個拷貝時，所述人類PD-L2的胞外區肽段、人類FLT-1胞外區第2個免疫球蛋白樣結構域的肽段和KDR胞外區第3個免疫球蛋白樣結構域的肽段為同源串聯重復或間隔串聯重復；

(3)所述融合蛋白還包含信號肽；

(4)所述人類PD-L2的胞外區肽段、人類FLT-1胞外區第2個免疫球蛋白樣結構域的肽段和/或KDR胞外區第3個免疫球蛋白樣結構域的肽段、人類免疫球蛋白的Fc段以及任選的信號肽之間為直接相連或通過1個或多個相同或者不同的Linker相連。

3.根據權利要求2所述的融合蛋白，其中，第(1)項中，所述人類免疫球蛋白IgG各亞型為IgG1、IgG2、IgG3或IgG4。

4.根據權利要求2所述的融合蛋白，其中，第(1)項中，所述Fc段為IgG4的全長Fc段。

5.根據權利要求2所述的融合蛋白，其中，第(3)項中，所述信號肽的氨基酸序列如SEQID NO：9所示。

6.根據權利要求2所述的融合蛋白，其中，第(4)項中，所述Linker的氨基酸序列如SEQID NO：11或SEQ ID NO：13所示。

7.根據權利要求1或2所述的融合蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO：15至SEQ ID NO：18中的任一序列所示。

8.一種分離的多核苷酸，其編碼權利要求1至7中任一權利要求所述的融合蛋白。

9.根據權利要求8所述的多核苷酸，其核苷酸序列如SEQ ID NO：19至SEQ ID NO：22中的任一序列或其簡并性序列所示。

10.一種重組載體，其含有權利要求8或9所述的多核苷酸。

11.根據權利要求10所述的重組載體，其為質粒、重組腺病毒、重組腺相關病毒或噬菌體。

12.根據權利要求11所述的重組載體，其中所述質粒為真核表達質粒或原核表達質粒。

13.根據權利要求11所述的重組載體，其中所述質粒為pCDNA3.1、pDC315或pAAV-MCS。

14.一種重組宿主細胞，其包含權利要求10至13中任一權利要求所述的重組載體。

15.根據權利要求14所述的重組宿主細胞，其中，所述宿主細胞為細菌。