[發明專利]一種T細胞信號的嵌合分子轉換器及其用途

有效

• 申請號: 201310046796.X
• 申請日: 2013-02-06
• 公開（公告）號: CN103965361B
• 公開（公告）日: 2018-10-30
• 發明（設計）人: 錢其軍;金華君;丁娜;俞德超;李林芳;吳孟超
• 申請（專利權）人: 上海細胞治療工程技術研究中心集團有限公司
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/62;C12N15/63;C12N15/79;C12N15/867;C12N5/10;A61K48/00;A61K38/16;A61P35/00
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所 11038
• 代理人: 劉海羅

1.一種分離的融合蛋白，其組成如下：

1)高效結合腫瘤細胞表面和/或腫瘤基質細胞表面的免疫抑制分子的肽段，

2)跨膜區，

3)共刺激信號分子胞內結構域肽段；以及

4)可選的信號肽；

其中，所述高效結合腫瘤細胞表面和/或腫瘤基質細胞表面的免疫抑制分子的肽段選自SEQ ID NO：1所示氨基酸序列的肽段；

其中，

所述跨膜區為CD28跨膜區；

所述共刺激信號分子胞內結構域肽段選自CD28和CD137/4-1BB中的一種或多種；

所述高效結合腫瘤細胞表面和/或腫瘤基質細胞表面的免疫抑制分子的肽段、跨膜區、共刺激信號分子胞內結構域肽段以及可選的信號肽之間為直接連接和/或通過一個或多個相同或不同的linker連接。

2.根據權利要求1所述的融合蛋白，其特征在于如下的(1)-(4)中的任一項或者多項：

(1)所述高效結合腫瘤細胞表面和/或腫瘤基質細胞表面的免疫抑制分子的肽段為單拷貝或雙拷貝；

(2)所述共刺激信號分子胞內結構域肽段為SEQ ID NO：5和/或SEQ ID NO：7所示氨基酸序列的肽段；

(3)所述共刺激信號分子胞內結構域肽段為單拷貝或雙拷貝；和

(4)所述融合蛋白還包含信號肽。

3.一種分離的融合蛋白，其氨基酸序列為SEQ ID NO：19、SEQ ID NO：21、SEQ ID NO：23、SEQ ID NO：25或SEQ ID NO：27所示的氨基酸序列。

4.根據權利要求1所述的融合蛋白，其中，所述信號肽為SEQ ID NO：11所示的序列。

5.根據權利要求1所述的融合蛋白，其中，所述linker的氨基酸序列如SEQ ID NO：13、SEQ ID NO：15或SEQ ID NO：17所示。

6.一種多核苷酸，其編碼權利要求1至5中任一權利要求所述的融合蛋白。

7.根據權利要求6所述的多核苷酸，其為SEQ ID NO：20、SEQ ID NO：22、SEQ ID NO：24、SEQ ID NO：26或SEQ ID NO：28所示的核苷酸序列或其簡并性序列。

8.一種重組載體，其包含權利要求6或7所述的多核苷酸。

9.根據權利要求8所述的重組載體，其中，所述重組載體為重組真核表達載體或重組病毒載體。

10.根據權利要求9所述的重組載體，其中，所述重組真核表達載體為重組pMXs-IRES-GFP載體；所述重組病毒載體為重組逆轉錄病毒載體、重組慢病毒載體。

11.根據權利要求10所述的重組載體，其中，所述重組逆轉錄病毒載體為重組pMXs-SCC-IRES-GFP病毒載體。

12.一種重組細胞，其包含權利要求8至11中任一權利要求所述的重組載體。

13.根據權利要求12所述的重組細胞，其中，所述重組細胞為重組腫瘤浸潤T淋巴細胞。

14.一種重組T細胞，其表達權利要求1至5中任一權利要求所述的融合蛋白。

15.由權利要求1至5中任一權利要求所述的融合蛋白或權利要求6或7所述的多核苷酸或權利要求8至11中任一權利要求所述的重組載體遺傳修飾的T細胞。

16.根據權利要求15所述的T細胞，其中，所述T細胞為腫瘤浸潤T淋巴細胞。