[發(fā)明專利]一類兒茶酚-O-甲基轉(zhuǎn)移酶的特異性探針底物及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310044369.8
• 申請日: 2013-02-04
• 公開（公告）號: CN103193746A
• 公開（公告）日: 2013-07-10
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 楊凌;夏楊柳;葛廣波;孫曉宇;寧靜;何桂元
• 申請（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所
• 主分類號: C07D311/16
• 分類號: C07D311/16;C12Q1/48
• 代理公司: 沈陽晨創(chuàng)科技專利代理有限責(zé)任公司 21001
• 代理人: 張晨

1.一類兒茶酚-O-甲基轉(zhuǎn)移酶的特異性探針底物，其特征在于：該特異性探針底物為7,8-二羥基香豆素類化合物，其結(jié)構(gòu)式見式（1），其中R₁為-CH₃、-Ph中的一種，R₂為-H、-OCH₃中的一種。

2.一種利用權(quán)利要求1所述特異性探針底物定量測定生物體系中COMT酶活的方法，其特征在于：采用上述式（1）化合物作為底物，該類底物在COMT酶的催化下僅選擇性生成7-O-甲基化產(chǎn)物，通過定量檢測單位時間內(nèi)甲基化產(chǎn)物的生成量來測定各生物樣品及細(xì)胞中COMT酶的活性。

3.按照權(quán)利要求2所述利用特異性探針底物定量測定生物體系中COMT酶活的方法，其特征在于：所述方法條件為：底物濃度介于1/10~10K_m之間；催化反應(yīng)時孵育體系pH介于5.5~10.5之間；反應(yīng)溫度介于20~60℃之間。

4.按照權(quán)利要求3所述利用特異性探針底物定量測定生物體系中COMT酶活的方法，其特征在于：所述催化反應(yīng)時孵育體系pH介于7.0~7.5之間。

5.按照權(quán)利要求3所述利用特異性探針底物定量測定生物體系中COMT酶活的方法，其特征在于：所述反應(yīng)溫度介于35~40℃之間。

6.按照權(quán)利要求3所述利用特異性探針底物定量測定生物體系中COMT酶活的方法，其特征在于：所述產(chǎn)物生成率或底物轉(zhuǎn)化率低于10%。

7.權(quán)利要求1所述特異性探針底物的應(yīng)用，其特征在于：該特異性探針底物用于人及哺乳動物組織制備液及各類組織細(xì)胞中COMT酶活的定量測定。