[發明專利]一種利用超聲波從林蛙體中提取抗菌肽的生產制備方法

有效

• 申請號: 201310044262.3
• 申請日: 2013-02-01
• 公開（公告）號: CN103073628A
• 公開（公告）日: 2013-05-01
• 發明（設計）人: 林萬君;陸軍;滕利榮;孟慶繁;逯家輝;王娟
• 申請（專利權）人: 通化康元生物科技有限公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K1/14
• 代理公司: 通化旺維專利商標事務所有限公司 22205
• 代理人: 王偉

?技術領域

本發明涉及一種林蛙抗菌肽提取方法，尤其是利用超聲波從林蛙體中提取抗菌肽的生產制備方法。其產品可廣泛的應用于藥品、食品、水果及蔬菜保鮮、日用化妝品及飼料添加劑等領域。

背景技術

在現有技術中，抗菌肽具有廣譜抗菌活性，對細菌有很強的殺傷作用，尤其是對一些耐藥性病原菌的殺滅作用更引起了人們的重視。鑒于抗菌肽天然廣譜抗菌、耐熱、無毒無藥殘、不易產生耐藥菌株等眾多的特點，抗菌肽有可能成為繼青霉素等傳統抗生素之后又一類重要的新型抗菌藥物。因此，抗菌肽的開發應用將是醫藥行業、食品行業、日化行業、飼料養殖行業等領域的一次革命，具有廣闊的應用前景。?????抗生素應用的最佳時機是感染的前期，抗菌肽對感染的前、中、后期都有顯著的效果，不存在時機問題。抗生素應用有配伍禁忌，抗菌肽可以和任何藥物配伍應用。抗生素在不同給藥方式會產生不同的治療效果，抗菌肽口服和注射的效果相同，不存在用藥注意事項，可以按照最方便的方法給藥。抗生素存在不同程度的副作用、藥殘等問題，使用中有停藥期的規定，抗菌肽無藥殘、無毒副作用，無停藥期規定。抗菌肽還有起效時間快，10分鐘內被吸收完畢而且100%被吸收。抗生素存在吸收利用不完全，以及代謝造成的蓄積中毒危險，對肝腎損傷最大，抗菌肽無積累性中毒現象，并有協助排毒功能，抗菌肽來自于動植物自身免疫系統，是純正的綠色產品，其抗菌肽在各行業的應用前景也很廣泛。

根據相關資料對東北林蛙皮抗菌肽的初步研究表明，林蛙皮分泌物由多種組分組成，一只東北林蛙個體可以同時在表面分泌多達12種的成熟抗菌肽。林蛙皮抗菌肽是具有廣譜抗菌作用的多肽。

林蛙皮抗菌肽在畜牧業中的應用：作為飼料添加劑，使轉化率、成活率有了較大的提高。

林蛙皮抗菌肽在日化用品中的應用：化妝品：溫和殺菌，消炎祛紅腫。

????衛生用品：有洗手液，沐浴露，濕紙巾等。抗菌肽無毒、無不良反應、無殘留且無致細菌耐藥性的一類環保型制劑，與酒精或抗生素等傳統抗菌成分比有巨大的優勢。

林蛙皮抗菌肽在剃須膏和須后水等男士用品：劃傷皮膚防感染，促進傷口愈合。

林蛙皮抗菌肽在口腔保健品：漱口水、口腔噴劑、牙膏、含片、口香糖等。適當添加抗菌肽達到殺菌，消炎的效果。

抗菌肽水溶性好，用于水果蔬菜保鮮可形成無色保護摸，殺死表面細菌，從而達到保鮮目的。

抗菌肽是具有生物活性的多肽類物質，對綠膿桿菌、金黃葡萄桿菌等多種病菌?和病毒都有明顯的殺滅效果。在醫藥中，林蛙皮抗菌肽可起到消炎，抗感染，抗真菌、促進傷口愈合的作用，如果將此液應用于燒燙傷產品中，在防止皮膚感染、止痛鎮痛方面都有明顯的效果。應用于日化產品中，對于皮膚無刺激性傷害，消炎殺菌消毒效果明顯。應用于果蔬保鮮能明顯延長保鮮期，應用于養殖業可提高家畜免疫力，提高攔存活率。

已有從林蛙表皮中提取抗菌肽的方法。如《吉林工學院學報》自然科學版2002年第2期發表了邱芳萍、周杰文章“從吉林林蛙皮中提取抗菌肽”，其方法是原料蛙皮、溶脹、抽提、離心制得。

再如《食品科學》2008年第10期發表了金莉莉;丁忠福;王秋雨文章“中國林蛙皮抗菌肽提取條件的優化研究”，其方法是原料蛙皮、浸提、冷凍干燥制得。

中國發明專利申請說明書于2009年06月17日公開了一種名稱為“林蛙抗菌肽及制備工藝和在抗病毒藥物中的應用”，專利申請號:?200810051423.0??申請日:2008.11.14。該發明公開了一種林蛙抗菌肽及其制備工藝，包括以下步驟：(1)將林蛙干蛙皮，用pH4．00．2mol／L的醋酸-醋酸鹽緩沖溶液以料液比為1：8-12(m／v)的比例室溫浸泡20—30小時；(2)將所得浸提液5000r．p．m離心30min，棄沉淀，留上清；將上清液再煮沸5min，冷卻，5000r．p．m離心30min，取上清過30KDa膜即得抗菌肽濾液。其缺點是原料直接采用林蛙皮，林蛙皮剝皮困難，并且費工費時，損失浪費嚴重。按此工藝得到的抗菌肽濾液其抗菌效果不夠理想。

發明內容

本發明目的是提供一種工藝優化、生產效率高、抗菌活力顯著的生物抗菌肽生產工藝及其制備方法。

本發明的技術解決方案是：一種利用超聲波從林蛙體中直接提取抗菌肽的生產制備方法，采用除塵除雜除脂除卵的林蛙干體為原料制備。

一種利用超聲波從林蛙體中直接提取抗菌肽的生產制備方法，其步驟如下：

（1）原料：林蛙干體；之前進行常規除脂除卵去塵除雜處理。