[發明專利]人靜脈注射免疫球蛋白中活化凝血因子Ⅺ檢測方法

有效

• 申請號: 201310041747.7
• 申請日: 2013-02-04
• 公開（公告）號: CN103185710A
• 公開（公告）日: 2013-07-03
• 發明（設計）人: 馬莉;孫盼;李長清;袁靖;陳云華;劉欣晏;楊剛
• 申請（專利權）人: 貴州泰邦生物制品有限公司;中國醫學科學院輸血研究所
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 貴陽中工知識產權代理事務所 52106
• 代理人: 陳忠俊

1.?人靜脈注射免疫球蛋白中活化凝血因子Ⅺ檢測方法，其特征是按以下步驟進行：（1）枸櫞酸鈉抗凝血漿中加入玉米胰蛋白酶抑制物，可特異、有效地避免因在采血過程中F凝血因子Ⅺ的預活化，從而得到不含活化凝血因子（FXIa）的血漿，從而分離制備出不含活化凝血因子（FXIa）的PPP；

(2）反應體系中加入凝血酶特異性熒光底物，特異的凝血酶熒光底物以及磷脂劑濃度的確定：凝血酶特異性熒光底物選擇B-VA-AMC,對不同濃度底物進行篩選，其中底物工作濃度為1~7mmol/L；磷脂劑選則腦磷脂，選擇工作濃度為1~3.5μmol/L；利用分光光度計連接計算機對凝血過程進行掃描，通過熒光信號強弱，可間接反映凝血酶生成含量變化，最后繪制動力學曲線；

（3）不同含量的活化人凝血因子FXIa標準品或人靜脈注射丙種球蛋白樣本中加入含磷脂劑的凝血酶熒光底物以及鈣離子源啟動凝血酶生成反應，反應結果通過熒光分光光度計檢監測凝血酶生成過程中熒光值的變化，最后使用GraphPad軟件處理數據得到凝血酶生成曲線，將受檢樣品的凝血酶生成含量達到最高時所需時間TTP與FXIa標準品的TTP進行比較，可以間接獲得受檢樣品中FXIa的水平。