[發明專利]一種高劑量地衣芽孢桿菌活菌組合物及其制備方法和用途

有效

• 申請號: 201310041544.8
• 申請日: 2013-02-01
• 公開（公告）號: CN103099821A
• 公開（公告）日: 2013-05-15
• 發明（設計）人: 李雪龍;雷健;陳偉;吳楠;彭勃
• 申請（專利權）人: 東北制藥(沈陽)科技發展有限公司
• 主分類號: A61K35/74
• 分類號: A61K35/74;A61K47/38;A61K47/26;A61P1/00;A61P1/12
• 代理公司: 沈陽維特專利商標事務所(普通合伙) 21229
• 代理人: 甄玉荃

技術領域

本發明屬于微生物技術領域，具體涉及本發明涉及一種高劑量地衣芽孢桿菌活菌組合物及其制備方法和用途。

背景技術

益生菌屬于一種微生態制劑，聯合國糧農組織/世界衛生組織將益生菌定義為：“活的微生物，當攝入達到足夠數量時將對宿主的健康帶來益處”。在這個定義包含3個關鍵點：首先是活菌，其次是有效劑量，最后是能產生有益健康的作用。前兩點屬于質量標準的范疇，第三點屬于健康聲稱的范疇。所有益生菌的立法和指導準則都是圍繞這三點進行細化的。

活性是關鍵，益生菌必須是“活的”，才能起到健康作用，這是益生菌產生功效的基礎；其次，益生菌的臨床效力與每日攝入量密切相關。大量的益生菌生理效應研究（如治療腹瀉、乳糖不耐受、提高糞酶活性等試驗室研究）證實，每日有效攝入量為10⁹-10¹⁰CFU。

對于急性或者慢性胃腸道感染、免疫或炎性疾病，益生菌的效果依賴于菌株選擇，不同的治療也需要不同的劑量。不可能制定統一的益生菌劑量標準，治療所需的劑量要依靠大量的研究來確定。益生菌達到臨床效應的活菌數，一般小腸中每克內容物的活菌數量≥10⁶CFU，結腸中每克內容物的活菌數量≥10⁸CFU。治療急性感染性腹瀉更需要短療程、高劑量的益生菌制劑。世界胃腸組織臨床指南對益生菌、益生元總結了一些臨床狀況。所需益生菌的劑量因菌株和產品不同而差異很大。雖然很多非處方產品提供的劑量范圍為10⁹-10¹⁰CFU/劑，但是某些產品被發現在較低劑量時也有效，而某些產品所需的劑量則要多得多。確定益生菌的普遍劑量是不現實的，劑量必須是針對菌株，來源于提示有健康功效的體內試驗。

發明專利92113318.9公開了一種地衣芽孢桿菌CMCC63516（CGMCC?No.0183）制成的微生態制劑，即整腸生。用于治療成人急性、慢性腹瀉及各種原因引起的腸道菌群失調癥，該專利提供的這種微生態制劑為每克活菌數9-11億，北京協和醫院吳梓濤等開展的Ⅱ期臨床的推薦劑量為每日攝入量1.5×10⁹CFU。地衣芽孢桿菌進入腸道后，需要快速的生長、增殖成為優勢菌群后才得以實現其藥效的發揮，拮抗葡萄球菌，酵母樣菌等致病菌，促進雙歧桿菌、乳桿菌、擬桿菌、消化鏈球菌生長，從而調整菌群失調達到治療目的，且具有無副作用，無殘留等優點。但遺憾的是，目前針對該產品使用劑量方面的研究較少，吳鐵林等人報道的應用地衣芽孢桿菌調治腸道菌群失調的研究，通過動物試驗證實了地衣芽孢桿菌63516極低的生物毒性，亞急性毒性試驗中，相當于LD₁₀十分之一的計量可達37500億/Kg；李玲等人報道整腸生常規劑量對于慢性腸炎的治療，效果較好。對于急性腹瀉，馮婉玉等人報道整腸生大劑量治療給藥具有良好效果，但均未就其最佳的劑量進行深入的研究。

有些患者為了不影響正常的工作和生活，希望快速解決腹瀉等相關疾病的困擾，所以在服用地衣芽孢桿菌活菌制劑時，均會自主加大用藥量。雖然達到了起效快、療程短的目的，但盲目加大用藥劑量，不科學、不規律，依從性也較差。所以為了提高用藥劑量的準確性，做到安全用藥，迫切需要針對腸道菌群失調研究更為安全、有效的劑量范圍，指導臨床用藥。

從發明專利92113318.9和201010578718.0公開的數據來看，目前地衣芽孢桿菌CMCC63516（CGMCC?No.0183）菌粉的活菌數均較低，一般在250-530億/g，另外，按發明專利92113318.9和201010578718.0公開的以無水碳酸鈣作為稀釋劑制備的菌粉，其流動性較差（休止角為：45.0°），因其在現有的10億/g的地衣芽孢桿菌活菌制劑中添加量有限，還未影響制劑的工業化生產，但如果添加量大于產品的15%，就會明顯降低制劑產品整體的流動性，較難實現工業化生產，所以過去這種以無水碳酸鈣作為稀釋劑制備地衣芽孢桿菌菌粉的方法已經不能適用本發明所涵蓋的高劑量范圍。

另外，以往的研究過多的關注每批發酵液菌泥的產量，但這解決不了單位質量菌粉中活菌含量不高的現狀，滿足不了使用少量的菌粉既可調配高劑量、高活菌數成品的目標，如何在保證菌泥產量的情況下，提升單位質量菌泥中的芽孢活菌數，已成為制約高劑量地衣芽孢桿菌活菌制劑開發的關鍵問題。因此，研制開發一種高劑量地衣芽孢桿菌活菌組合物及其制備方法和用途一直是亟待解決的課題。

發明內容