[發(fā)明專利]膽固醇修飾的生物可降解聚陽離子載體及制備方法和用途

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310038621.4
• 申請日: 2013-01-31
• 公開（公告）號: CN103110954A
• 公開（公告）日: 2013-05-22
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王堅成;張強;陳成軍;高玲燕
• 申請（專利權(quán)）人: 北京大學(xué)
• 主分類號: A61K47/34
• 分類號: A61K47/34;A61K48/00;A61K45/00;A61K38/00;C08G73/02
• 代理公司: 北京華科聯(lián)合專利事務(wù)所 11130
• 代理人: 王為

1.一種膽固醇修飾的生物可降解聚陽離子載體，其特征在于，是由平均分子量2kD-20kD的功能化線性聚（酰胺-胺）與膽固醇通過酰胺鍵或酯鍵化學(xué)偶聯(lián)形成的；其中所述線性聚（酰胺-胺）是由N，N'-雙(丙稀酰)胱胺與含-NH₂單體通過邁克爾加成反應(yīng)聚合形成的具有重復(fù)單元的線性聚合物，且聚合物中每個單元結(jié)構(gòu)中均含有二硫鍵。

2.根據(jù)權(quán)利要求1的載體，其特征在于，其臨界膠團濃度>1mg/L，在水相介質(zhì)中自組裝形成納米顆粒，粒徑介于20-200nm，納米顆粒表面帶正電荷，膽固醇接枝率為1％-90％。

3.根據(jù)權(quán)利要求1的載體，其特征在于，所述的含-NH₂單體選自：N，N’-二甲基二亞丙基三胺，組胺，4-氨基-1-丁醇，多巴胺，半胱胺酸，半胱胺鹽酸鹽，阿霉素，米托蒽醌。

4.根據(jù)權(quán)利要求1的載體，其特征在于，其中的功能化線性聚（酰胺-胺）和膽固醇的連接方式通過膽固醇酰氯直接或間接與線性聚（酰胺-胺）母鏈上的-NH₂或-NH-通過酰胺鍵連接，在采用間接連接時，可以選用的連接臂包括：-(CH₂)_n-，-S-S-,以及其他基團，其中n=1-10。

5.根據(jù)權(quán)利要求1的載體，其特征在于，可利用其結(jié)構(gòu)中疏水區(qū)攜載脂溶性化學(xué)藥物，利用其表面正電荷特性攜載治療性DNA、siRNA、miRNA等基因藥物或多肽蛋白藥物。

6.一種含有權(quán)利要求1所述載體的藥物組合物，其特征在于，所述藥物選自任何適合該載體的藥物。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的藥物組合物，其特征在于，其中所述藥物選自：治療性DNA、siRNA、miRNA、多肽蛋白藥物以及抗腫瘤藥物。

8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的藥物組合物，其特征在于，包括被脂質(zhì)體包裹形成的脂質(zhì)復(fù)合納米粒。

9.權(quán)利要求1所述載體的制備方法，其特征在于，步驟如下：

精密量取等摩爾比的N，N’-雙（丙烯酰）胱胺和含-NH₂單體，溶解于溶劑中，在37℃氬氣保護條件下，避光反應(yīng)，待反應(yīng)溶液變粘稠后，產(chǎn)物用無水乙醇透析，旋蒸除去乙醇溶劑，產(chǎn)物真空干燥24小時，最終得到功能化線性聚酰胺-胺，然后，在冰水浴的條件下，將100mg的上述線性聚酰胺-胺溶解于無水二氯甲烷溶劑中，然后依次加入膽固醇酰氯和三乙胺，反應(yīng)進行24小時，反應(yīng)結(jié)束后，旋蒸除去反應(yīng)溶劑，然后將產(chǎn)物溶解在乙醇/去離子水混合溶劑中，用鹽酸調(diào)節(jié)產(chǎn)物溶液的pH值至4.0，產(chǎn)物用無水乙醇透析3天后，冷凍干燥得到膽固醇修飾的聚酰胺-胺。

10.權(quán)利要求6所述藥物組合物的制備方法，其特征在于，步驟如下：

精密稱取一定量的膽固醇修飾的載體材料，加入無水乙醇溶解，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)成膜，然后加入5％的葡萄糖溶液，水浴超聲得到空白納米顆粒混懸液，然后將siRNA與空白納米顆粒混合，室溫條件下孵育15min即得。