[發明專利]一種用于秈粳亞種廣親和育性位點片段聚合的分子標記引物組合及其應用

有效

• 申請號: 201310037291.7
• 申請日: 2013-01-30
• 公開（公告）號: CN103103279A
• 公開（公告）日: 2013-05-15
• 發明（設計）人: 萬建民;趙志剛;江玲;王益華;劉裕強;陳亮明;劉世家;劉喜;陳賽華;張文偉
• 申請（專利權）人: 南京農業大學
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司 32218
• 代理人: 徐冬濤;傅婷婷

1.秈粳亞種廣親和育性位點片段聚合的分子標記方法，其特征在于，用分子標記引物W5、W7和W17分別對育性位點S5-n位點、S7-n位點和S17-n位點的廣親和育性片段通過分子標記選擇來聚合，其中

用分子標記引物W5：左端引物序列SEQ?ID?NO.1，右端引物序列SEQ?IDNO.2擴增廣親和水稻品種DNA，獲得S5-n位點標記片段大小為105bp；擴增秈稻品種DNA，獲得S5-i位點標記片段大小為145bp；擴增粳稻品種DNA，獲得S5-位點標記片段大小為13；

用分子標記引物W7：左引物序列SEQ?ID?NO.3，右引物序列SEQ?IDNO.4擴增廣親和品種DNA，獲得S7-n位點標記片段有2條帶，大小分別為140bp和175bp；秈稻品種DNA，獲得S7-i位點標記片段大小為150bp；擴增粳稻品種DNA，獲得S7-j位點標記片段有2條帶，大小分別為140bp和150bp；

用分子標記引物W17：左端引物序列SEQ?ID?NO.5，右端引物序列SEQ?IDNO.6擴增廣親和品種DNA，獲得S17-n位點標記片段大小為200bp；擴增秈稻品種DNA，獲得S17-i位點標記片段大小為180bp；擴增粳稻品種DNA，獲得S17-j位點標記片段有2條帶，大小分別為180bp和190bp。

2.一種用于秈粳亞種廣親和育性位點片段聚合的分子標記引物組合，其特征在于由分子標記引物W5、W7和W17組成，其中，分子標記引物W5、W7和W17分別對育性位點S5位點、S7位點和S17位點，分子標記引物W5的左端引物序列為SEQ?ID?NO.1，右端引物序列為SEQ?ID?NO.2；分子標記引物W7的左端引物序列為SEQ?ID?NO.3，右端引物序列為SEQ?ID?NO.4；分子標記引物W17的左端引物序列為SEQ?ID?NO.5，右端引物序列為SEQ?ID?NO.6。

3.權利要求2所述的分子標記引物組合在雜交育種中的應用。

4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于權利要求2所述的分子標記引物組合在聚合多個廣親和基因的水稻品種的選育中的應用。

5.根據權利要求4所述的應用，其特征在于包含如下步驟：

權利要求1所述分子標記方法的應用，包括：

（1）以高產秈稻恢復系鎮恢129為母本，和高抗白葉枯病的抗63雜交得F1種子，冬季把F1種子帶海南加代，再與帶有粳稻廣親和品種02428血緣的R437復交，在分離三交群體中，分別用S5位點的標記W5；S7位點的標記W7；S17位點的標記W17進行檢測；在分離群體中只要帶有這3個位點的片段，同時包含雜合片段，都在當季收種；在隨后的每一個世代中，都用同樣的方法進行檢測，一直到復交CF8世代得到一個基本穩定的秈稻恢復系材料W8733，即鎮恢129/抗63//R437；

（2）以秈稻恢復系材料W8733作育種材料進一步自交，發現株系W107表現穩定整齊一致，株型好，同時用權利要求2所述的分子標記引物組合對3個廣親和位點：S5-n位點、S7-n位點和S17-n位點進行檢測，結果表明W107都帶有S5-n位點、S7-n位點和S17-n位點的片段，將該株系暫定名為恢復系W107。