[發明專利]一種海洋地衣芽孢桿菌抗腫瘤蛋白的制備方法及其應用無效
| 申請號： | 201310034692.7 | 申請日： | 2013-01-30 |
| 公開（公告）號： | CN103966287A | 公開（公告）日： | 2014-08-06 |
| 發明（設計）人： | 張付云;徐鳳;楊陽;蒼桂璐;王維才 | 申請（專利權）人： | 大連海洋大學;張付云 |
| 主分類號： | C12P21/00 | 分類號： | C12P21/00;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/30;A61K38/16;A61P35/00;A61P35/02;C12R1/10 |
| 代理公司： | 大連非凡專利事務所 21220 | 代理人： | 曲寶威 |
| 地址： | 116000 遼*** | 國省代碼： | 遼寧;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 海洋 地衣 芽孢 桿菌 腫瘤 蛋白 制備 方法 及其 應用 | ||
【權利要求書】：
1.一種海洋地衣芽孢桿菌抗腫瘤蛋白的制備方法，其特征在于：步驟如下：
a、取干凈、新鮮的海帶并滅菌處理，所述的滅菌處理是用75%的酒精和1%的氯化汞對海帶的表面進行滅菌處理；
滅菌處理后對海帶進行研磨，將研磨液均勻涂布于牛肉膏蛋白胨平板培養基上，在37℃的條件下恒溫培養5~7天；
b、挑取單菌落反復劃線培養至純菌株，得到地衣芽孢桿菌Bacillus licheniformis，該菌株已于2012年12月31日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心（CGMCC）,保藏號為CGMCC No. 7077；
c、以抑菌活性為指標優化菌株培養條件，優化的培養條件為菌株DNN6在pH 9，蔗糖50 g/L和蛋白胨10 g/L的培養基中25℃發酵6天；
d、8000 r/min離心去除菌體，在上清液中加入硫酸銨，硫酸銨的飽和終濃度為95%，4℃靜置過夜，過濾將沉淀用蒸餾水溶解后，再用截留分子量為3600道爾頓的透析袋透析4天，取透析袋中物冷凍干燥，得到海洋地衣芽孢桿菌抗腫瘤蛋白。
2.根據權利要求1所述的海洋地衣芽孢桿菌抗腫瘤蛋白在抗腫瘤方面的應用。
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