[發明專利]一種免疫組化用二抗顯色系統靈敏度、親和力的測定方法

有效

• 申請號: 201310031750.0
• 申請日: 2013-01-29
• 公開（公告）號: CN103116029A
• 公開（公告）日: 2013-05-22
• 發明（設計）人: 林齊心;陳贊烽;熊玉林;王小亞
• 申請（專利權）人: 福州邁新生物技術開發有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N21/78
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學俊

1.一種免疫組化用二抗顯色系統靈敏度、親和力的測定方法，其特征在于：所述測定方法包括下列工藝步驟：將能與二抗發生特異性免疫反應的一抗按不同稀釋的濃度預先吸附在玻片上，一個濃度的一種多肽在玻片上經上樣后形成一個小圓斑；或是將經過包埋的不同濃度的一抗石蠟切片預先放置在玻片上，與病理組織切片同時經歷常規免疫組化操作步驟，以特定一抗的染色結果來判定免疫組化過程二抗顯色系統的靈敏度及親和力。

2.根據權利要求1所述的一種免疫組化用二抗顯色系統靈敏度、親和力的測定方法，其特征在于：所述預先吸附在玻片上是以物理吸附的方式，吸附在免疫組化用的玻片上。

3.根據權利要求1所述的一種免疫組化用二抗顯色系統靈敏度、親和力的測定方法，其特征在于：所述常規免疫組化操作步驟包括：干燥、石蠟作用、脫蠟、水化、修復、二抗反應、染色。

4.根據權利要求2所述的一種免疫組化用二抗顯色系統靈敏度、親和力的測定方法，其特征在于：所述石蠟作用是將一抗點樣在玻片上并干燥后，將玻片加入熔化的石蠟中浸泡，保證點樣位置浸泡于石蠟中，然后將載玻片取出冷卻固化。

5.根據權利要求1所述的一種免疫組化用二抗顯色系統靈敏度、親和力的測定方法，其特征在于：所述一抗的染色結果，是指一抗的斑點顏色從濃度由低到高表現為逐漸加深的現象；再通過顯微鏡對病理組織切片進行觀察，根據病理組織切片上靶位顏色可顯示的最低濃度判定檢測一抗的最低濃度，以確定二抗檢測系統的靈敏度。

6.根據權利要求1所述的一種免疫組化用二抗顯色系統靈敏度、親和力的測定方法，其特征在于：所述以特定一抗的染色結果來判定免疫組化過程二抗顯色系統的靈敏度及親和力的具體方法為：對染色結果進行拍照，用圖像軟件對呈色斑點進行光密度測量，通過對應一抗濃度與光密度，計算二抗檢測系統與一抗的親和力；一抗與二抗結合顯示的光密度值達到飽和值50%時，其一抗的濃度即為該二抗顯色系統的親和力指數，以μg/L表示，通過比較不同來源二抗樣品的親和力指數衡量二抗的親和力高低。