[發明專利]一種用精液蛋白基因檢測昆蟲卵孵化率的方法無效
| 申請號： | 201310031405.7 | 申請日： | 2013-01-28 |
| 公開（公告）號： | CN103060465A | 公開（公告）日： | 2013-04-24 |
| 發明（設計）人： | 鄒德玉;陳紅印;張禮生;王樹英;陳長風;王孟卿;劉晨曦 | 申請（專利權）人： | 中國農業科學院植物保護研究所 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245 | 代理人： | 關暢 |
| 地址： | 100081 北*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 精液 蛋白 基因 檢測 昆蟲 孵化率 方法 | ||
1.用于檢測精液蛋白CSSFP066編碼基因表達量的物質在檢測昆蟲卵孵化率中的應用；
所述精液蛋白CSSFP066的氨基酸序列為序列表中的序列2。
2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于：所述昆蟲為昆蟲個體或昆蟲種群；
所述精液蛋白CSSFP066編碼基因的核苷酸序列為序列表中的序列1或序列表中的序列1自5’末端第1-312位核苷酸；
所述昆蟲具體為蠋蝽。
3.根據權利要求1或2所述的應用，其特征在于：所述用于檢測精液蛋白CSSFP066編碼基因表達量的物質為如下1）-3）中任意一種：
1）引物對A：所述引物對由引物1和引物2組成；所述引物1的核苷酸序列為序列表中序列3；所述引物2的核苷酸序列為序列表中序列4；
2）含有所述引物對A的RT-PCR試劑；
3）含有所述引物對A或所述RT-PCR試劑的試劑盒。
4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于：
所述RT-PCR試劑由水、RT-PCR擴增緩沖液、鎂離子、dNTPs、所述的引物對A、熒光染料和Taq酶組成；
所述引物對A中的各條引物在所述RT-PCR試劑中的終濃度具體為0.2-1μM，所述引物對A中的各條引物在所述RT-PCR試劑中的終濃度進一步具體為0.25uM；
所述試劑盒還包括內參引物對B，所述內參引物對B由引物3和引物4組成；所述引物3的核苷酸序列為序列表中的序列6；所述引物4的核苷酸序列為序列表中的序列7。
5.一種檢測昆蟲卵孵化率的方法，包括如下步驟：用權利要求3或4應用中所述的引物對A或所述的RT-PCR試劑或所述的試劑盒對待測的昆蟲A和B進行RT-PCR擴增；
若所述昆蟲A的精液蛋白CSSFP066基因的表達量高于所述昆蟲B，則所述昆蟲A的卵孵化率高于所述昆蟲B。
6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于：所述昆蟲為昆蟲個體或昆蟲種群；
所述RT-PCR擴增的模板為昆蟲的cDNA；
所述昆蟲具體為蠋蝽。
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