[發明專利]一種用于檢測仙靈骨葆膠囊的質量的方法

無效

• 申請號: 201310030983.9
• 申請日: 2013-01-25
• 公開（公告）號: CN103105444A
• 公開（公告）日: 2013-05-15
• 發明（設計）人: 姚志紅;戴毅;屠鳳娟;程紅;王新巒;秦嶺;姚新生;王曉春;周寧
• 申請（專利權）人: 貴州同濟堂制藥有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 北京弘權知識產權代理事務所(普通合伙) 11363
• 代理人: 郭放;張文

技術領域

本發明涉及中藥質量的檢測領域，具體涉及一種包含淫羊藿、續斷、補骨脂、丹參、知母、地黃六味中藥的復方仙靈骨葆膠囊質量的檢測方法。

背景技術

中藥復方制劑“仙靈骨葆”膠囊是由著名骨傷科專家時光達教授依據中醫學“腎主骨”的骨代謝平衡理論，在苗族民間驗方的基礎上，結合多年臨床驗證篩選后研制而成。它是由淫羊藿、續斷、丹參、補骨脂、知母、地黃六味中藥組成的復方中成藥制劑。淫羊藿，別名仙靈脾，其性溫，味辛、甘，歸腎、肝經，補腎精，強筋骨。續斷，其性微溫，味辛、甘、苦，歸腎、肝經，補肝腎，行血脈，續筋骨。補骨脂，其性大溫，味辛、苦，歸腎、脾經，補腎壯陽，固精縮尿。地黃，其性微溫，味甘，歸腎、肝經，養血滋陰，補精益髓。丹參，其性微寒，味苦，益氣養血，活血化瘀。知母，其性寒，味苦、甘，活血化瘀，滋陰潤燥。方中以淫羊藿、續斷、補骨脂、地黃補精填髓，強精壯骨；由于有瘀血阻滯脈絡不通，不通則痛，氣血失去滋養，則以丹參、知母益氣活血，化瘀，瘀去則新生，通則不痛。全方以補腎壯骨為主，兼以活血化瘀，以達到標本兼治之效。

通過現代循證醫學原則——“隨機分組、雙盲對照，多中心觀察”進行的臨床實驗，確認了“仙靈骨葆”膠囊抗骨質疏松的臨床療效及其安全性。2007年，美國藥品評價機構信納克醫學研究中心按照循證醫學原理，對仙靈骨葆的臨床藥效進行了確認，隨后，又啟動了仙靈骨葆在美國的FDA認證程序。這是我國第一個按照國際通行藥品驗證標準和美國食品藥品監督管理局（FDA）標準評定的中藥相關實驗。仙靈骨葆膠囊已入選《國家基本藥物目錄》（2009版）。在臨床上，仙靈骨葆主要用于骨質疏松癥的預防和治療。但是，到目前為止，對于仙靈骨葆的質量標準較低，現行國家食品藥品監督管理局藥品標準（試行）（WS-10269(ZD-0269)-2002），僅對其中單個成分淫羊藿苷的含量進行了規定，即“每克仙靈骨葆膠囊粉末中淫羊藿苷的含量不低于3毫克”。根據2010年藥典編制大綱提出中成藥及中藥材應“逐步由單一指標性成分定性定量測定，向活性、有效成分及生物測定的綜合檢測過渡，向多成分和指紋或特征圖譜整體質量控制模式轉化”。其中，在對鑒定的技術要求中指出，所采用的色譜特征圖譜，“應至少指認其中3個以上的有效成分、特征成分或主成分并對其比例作出規定，而指認峰的峰面積之和應大于總峰面積的50%?！保▍⒁?010年版《中華人民共和國藥典》一部提取物質量標準起草技術要求）。

為此，有必要建立一種穩定、精密度高的多成分和特征指紋圖譜，用以科學、有效地檢測中藥復方制劑仙靈骨葆膠囊的質量。該指紋圖譜應具有以下幾個特點：

1、至少應指認出指紋圖譜中3個以上的色譜峰，指認色譜峰的峰面積之和應大于總峰面積的50%；

2、指認的色譜峰應能覆蓋復方中的組成中藥；

3、指認的色譜峰應當覆蓋與組方（復方）功效大體相應的活性成分。

發明內容

為解決現有技術存在的問題與不足，本發明的主要目的在于基于包含淫羊藿、續斷、補骨脂、丹參、知母、地黃六味中藥的復方仙靈骨葆膠囊的指紋圖譜提供一種簡便、穩定、精密度高的質量檢測方法。

本發明的主要目的通過下列技術方案實現：本發明提供用于檢測仙靈骨葆膠囊的質量的方法，包括采用反相高效液相色譜法建立仙靈骨葆膠囊的標準指紋圖譜，其中所述標準指紋圖譜含有22-32個色譜峰，優選27個色譜峰，所述色譜峰的峰面積總和大于50%的總峰面積，優選地所述27個色譜峰的峰面積總和占總峰面積的50%至90%，優選地60%至70%，更優選地為70%。

建立仙靈骨葆膠囊的標準指紋圖譜的步驟包括A.制備仙靈骨葆膠囊的供試品溶液；B.制備對照品溶液；C.采用高效液相色譜儀進行色譜分析，記錄色譜圖；D.以朝藿定C的色譜保留時間為1計算得到的各色譜峰的相對保留時間，得到所述標準指紋圖譜。

本發明還包括確定所述標準指紋圖譜的重現性的步驟。通過對6份仙靈骨葆膠囊內容物的指紋圖譜進行相似性分析，所述標準指紋圖譜的相似度為0.99。

本發明還包括富集所述色譜峰及鑒定所述色譜峰對應的化合物結構的步驟。本發明還包括在所述鑒定所述色譜峰對應的化合物結構的步驟之后，分析所述化合物體外抗骨質疏松活性的步驟。