[發(fā)明專利]一種用于檢測(cè)仙靈骨葆膠囊的質(zhì)量的方法

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310030983.9
• 申請(qǐng)日: 2013-01-25
• 公開（公告）號(hào): CN103105444A
• 公開（公告）日: 2013-05-15
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 姚志紅;戴毅;屠鳳娟;程紅;王新巒;秦嶺;姚新生;王曉春;周寧
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 貴州同濟(jì)堂制藥有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02
• 代理公司: 北京弘權(quán)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11363
• 代理人: 郭放;張文

1.一種用于檢測(cè)仙靈骨葆膠囊的質(zhì)量的方法，包括采用反相高效液相色譜法建立仙靈骨葆膠囊的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜，其中所述標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜含有22-32個(gè)色譜峰，優(yōu)選27個(gè)色譜峰，所述色譜峰的峰面積總和大于50%的總峰面積，優(yōu)選地所述27個(gè)色譜峰的峰面積總和占總峰面積的50%至90%，優(yōu)選地60%至70%，更優(yōu)選地為70%。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，建立仙靈骨葆膠囊的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的步驟包括A.制備仙靈骨葆膠囊的供試品溶液；B.制備對(duì)照品溶液；C.采用高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分析，記錄色譜圖；D.以朝藿定C的色譜保留時(shí)間為1計(jì)算得到的各色譜峰的相對(duì)保留時(shí)間，得到所述標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述反相高效液相色譜法的色譜條件是：采用十八烷基硅氧鍵合硅膠為固定相；以各自含體積分?jǐn)?shù)0.1%的甲酸的乙腈和水(作為流動(dòng)相，梯度洗脫；流速為0.5-1.1mL/min、優(yōu)選0.8mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)為240-300nm，優(yōu)選270nm；色譜柱溫度為30-40°C優(yōu)選地35°C；以朝藿定C計(jì)算，理論塔板數(shù)在5000-8000范圍之內(nèi)。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，還包括確定所述標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的重現(xiàn)性的步驟。

5.根據(jù)權(quán)利要求1至4中任一項(xiàng)所述所述的方法，其特征在于，還包括富集所述色譜峰及鑒定所述色譜峰對(duì)應(yīng)的化合物結(jié)構(gòu)的步驟。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，還包括在所述鑒定所述色譜峰對(duì)應(yīng)的化合物結(jié)構(gòu)的步驟之后，分析所述化合物體外抗骨質(zhì)疏松活性的步驟。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜含有27個(gè)色譜峰，所述27個(gè)色譜峰鑒定為木蘭堿、芒果苷、當(dāng)藥苷、補(bǔ)骨脂苷、異補(bǔ)骨脂苷、毛蕊花糖苷、淫羊藿苷E、雙葉淫羊藿B、淫羊藿苷A、丹酚酸B、4”-O-乙?；?3”-O-吡喃木糖基淫羊藿苷A、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷、異補(bǔ)骨脂素、大花淫羊藿苷F、2″-O-鼠李糖基淫羊藿次苷II、異補(bǔ)骨脂二氫黃酮、淫羊藿次苷Ⅱ、新補(bǔ)骨脂異黃酮、補(bǔ)骨脂定、補(bǔ)骨脂乙素、補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚、corylifolA、丹參酮ⅡA、補(bǔ)骨脂酚。

8.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述制備仙靈骨葆膠囊的供試品溶液的步驟包括將仙靈骨葆膠囊內(nèi)容物加入到體積分?jǐn)?shù)為60%甲醇中，使得仙靈骨葆膠囊內(nèi)容物的濃度為0.02g/ml，充分混合，離心，過0.45μm微孔濾膜，取續(xù)濾液即得仙靈骨葆膠囊的供試品溶液。

9.一種建立仙靈骨葆膠囊的指紋圖譜的方法，包括

制備仙靈骨葆膠囊的供試品溶液；

制備對(duì)照品溶液：

采用高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分析，記錄色譜圖；

以朝藿定C的色譜保留時(shí)間為1計(jì)算得到的各色譜峰的相對(duì)保留時(shí)間，得到指紋圖譜。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法獲得的指紋圖譜在檢測(cè)仙靈骨葆膠囊的質(zhì)量中的應(yīng)用。