[發明專利]調整禽畜腸道菌群益生菌微生物菌劑及制備方法

無效

• 申請號: 201310027976.3
• 申請日: 2013-01-25
• 公開（公告）號: CN103060247A
• 公開（公告）日: 2013-04-24
• 發明（設計）人: 張清敏;趙穎
• 申請（專利權）人: 趙穎;昆明華曦飼料有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/16;A23K1/16;A23K1/18;C12R1/72;C12R1/46;C12R1/125;C12R1/07;C12R1/25;C12R1/01
• 代理公司: 昆明今威專利商標代理有限公司 53115
• 代理人: 賽曉剛

技術領域

????本發明涉及一種調整禽畜腸道菌群益生菌微生物菌劑及制備方法，具體說，是一種調整禽畜腸道菌群結構、取代抗生素預防禽畜腸道疾病及呼吸道疾病的益生菌菌劑及其制備方法。

背景技術

現在已有不少關于養殖業為了防止禽畜發病濫用抗生素、濫用獸藥的報道，不僅養殖成本增加，而且導致牛奶、雞蛋和各種肉產品品質下降，不健康風險增加、嚴重影響養殖業的持續發展。但是，在養殖業中由于多是集約式養殖，養殖環境和周邊環境質量差，禽畜容易產生呼吸道、腸道疾病，市場迫切需要一種無殘留、無毒性、成本低的飼料添加劑，取代抗生素、有害獸藥，以保證養殖禽畜健康生長，從而提高禽畜產品的品質和質量。益生菌菌劑正是無殘留、無毒性，以調整禽畜腸道菌群結構為目標，而達到預防腸道疾病和呼吸道疾病的目的。在養殖周期內，除了必要的免疫外，可以不用抗生素和獸藥。??

發明內容

本發明的目的是提供一種調整禽畜腸道菌群益生菌微生物菌劑及制備方法，該菌劑能調整禽畜腸道菌群結構，促進益生菌生長，抑制有害菌生長，可以提高飼料利用率，能明顯降低禽畜排泄物的臭味，改善養殖生態環境和周邊環境，高效、無毒、無殘留，能廣泛應用于禽畜飼料添加劑，預防禽畜腸道疾病和呼吸道疾病。

為了解決上述技術問題，本發明采用的技術方案是：這種調整禽畜腸道菌群益生菌微生物菌劑，由產朊假絲酵母（Candida?utilis）、糞鏈球菌（Streptococcus?feacalis）、枯草芽孢桿菌（Bacillus?subtilis）、納豆芽孢桿菌（Bacillus?natto）、植物乳桿菌（Lactobacillus?plantarum）和沼澤紅假單胞菌（Rhodopseudomonas?palustris）6種菌組成，經過三級液體發酵，再將擴大培養發酵菌液與麥麩均勻混合，經固體發酵，低溫干燥而制備的調整禽畜腸道菌群結構的益生菌菌劑。

這種調整禽畜腸道菌群益生菌菌劑的制備方法包括以下步驟：

（1）按微生物發酵工程工藝，先將斜面保存產朊假絲酵母菌種用馬鈴薯培養基PDA活化，經三級逐級擴大培養，制備成產朊假絲酵母的一級種子菌液；同理，糞鏈球菌、枯草芽孢桿菌、納豆芽孢桿菌、植物乳桿菌和沼澤紅假單胞菌5種細菌分別用牛肉膏蛋白胨培養基活化，經過三級逐級擴大培養，制備成糞鏈球菌等5種細菌的一級種子菌液；

（2）將產朊假絲酵母和糞鏈球菌、枯草芽孢桿菌、納豆芽孢桿菌、植物乳桿菌和沼澤紅假單胞菌5種細菌的一級種子菌液用玉米粉-豆粕-馬鈴薯-蔗糖培養基進行二級、三級擴大培養；

所述二級擴大培養條件：?將熱帶假絲酵母和糞鏈球菌、枯草芽孢桿菌、納豆芽孢桿菌、植物乳桿菌和沼澤紅假單胞菌5種細菌的一級種子液等體積混合，按接種量質量比1:10?的6種菌的一級種子混合菌液，溫度30℃，轉速100-200r/min，,壓力0.05MPa，發酵20-24h，?在無菌條件下抽取10mL發酵液，稀釋100倍，檢查波長660nm吸光值OD，OD達到0.6-0.8后，再轉入三級擴大培養階段；

所述三級擴大培養條件：按接種量質量比1:10二級擴大培養液，溫度28-30℃，轉速200-300r/min，壓力0.05MPa，發酵20-24h,?抽取10mL發酵液，稀釋100倍，檢查波長660nmOD值，OD達到0.6-0.8后，停止培養，有效菌菌落數用平板稀釋法在1*10¹⁰cfu.mL^-1以上，cfu-菌落數。

這種調整禽畜腸道菌群益生菌菌劑的制備方法，所述玉米粉-豆粕-馬鈴薯-蔗糖培養基組成按質量份數為：玉米粉20-30份，豆粕1-2份，馬鈴薯10-20份，蔗糖2份，氯化鈉0.5份，磷酸氫二鉀0.5份，硝酸鉀10份，硫酸鎂0.5份，硫酸亞鐵0.002份，自來水1000份，用過飽和氫氧化鈣調節pH值7.4-7.6。

這種調整禽畜腸道菌群益生菌菌劑的制備方法，所述菌劑所用菌種安全、可靠，購買于中國微生物菌種保藏管理委員會農業微生物中心，都是農業部飼料添加劑允許使用菌種。發酵生產過程中全部用不銹鋼發酵罐完成，無廢氣、廢物、廢水產生，無重金屬污染。產品作為飼料添加劑，符合農業部有關飼料添加劑的標準要求。