[發(fā)明專利]調(diào)整禽畜腸道菌群益生菌微生物菌劑及制備方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310027976.3
• 申請日: 2013-01-25
• 公開（公告）號: CN103060247A
• 公開（公告）日: 2013-04-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張清敏;趙穎
• 申請（專利權(quán)）人: 趙穎;昆明華曦飼料有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/16;A23K1/16;A23K1/18;C12R1/72;C12R1/46;C12R1/125;C12R1/07;C12R1/25;C12R1/01
• 代理公司: 昆明今威專利商標(biāo)代理有限公司 53115
• 代理人: 賽曉剛

技術(shù)領(lǐng)域

????本發(fā)明涉及一種調(diào)整禽畜腸道菌群益生菌微生物菌劑及制備方法，具體說，是一種調(diào)整禽畜腸道菌群結(jié)構(gòu)、取代抗生素預(yù)防禽畜腸道疾病及呼吸道疾病的益生菌菌劑及其制備方法。

背景技術(shù)

現(xiàn)在已有不少關(guān)于養(yǎng)殖業(yè)為了防止禽畜發(fā)病濫用抗生素、濫用獸藥的報(bào)道，不僅養(yǎng)殖成本增加，而且導(dǎo)致牛奶、雞蛋和各種肉產(chǎn)品品質(zhì)下降，不健康風(fēng)險(xiǎn)增加、嚴(yán)重影響?zhàn)B殖業(yè)的持續(xù)發(fā)展。但是，在養(yǎng)殖業(yè)中由于多是集約式養(yǎng)殖，養(yǎng)殖環(huán)境和周邊環(huán)境質(zhì)量差，禽畜容易產(chǎn)生呼吸道、腸道疾病，市場迫切需要一種無殘留、無毒性、成本低的飼料添加劑，取代抗生素、有害獸藥，以保證養(yǎng)殖禽畜健康生長，從而提高禽畜產(chǎn)品的品質(zhì)和質(zhì)量。益生菌菌劑正是無殘留、無毒性，以調(diào)整禽畜腸道菌群結(jié)構(gòu)為目標(biāo)，而達(dá)到預(yù)防腸道疾病和呼吸道疾病的目的。在養(yǎng)殖周期內(nèi)，除了必要的免疫外，可以不用抗生素和獸藥。??

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種調(diào)整禽畜腸道菌群益生菌微生物菌劑及制備方法，該菌劑能調(diào)整禽畜腸道菌群結(jié)構(gòu)，促進(jìn)益生菌生長，抑制有害菌生長，可以提高飼料利用率，能明顯降低禽畜排泄物的臭味，改善養(yǎng)殖生態(tài)環(huán)境和周邊環(huán)境，高效、無毒、無殘留，能廣泛應(yīng)用于禽畜飼料添加劑，預(yù)防禽畜腸道疾病和呼吸道疾病。

為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：這種調(diào)整禽畜腸道菌群益生菌微生物菌劑，由產(chǎn)朊假絲酵母（Candida?utilis）、糞鏈球菌（Streptococcus?feacalis）、枯草芽孢桿菌（Bacillus?subtilis）、納豆芽孢桿菌（Bacillus?natto）、植物乳桿菌（Lactobacillus?plantarum）和沼澤紅假單胞菌（Rhodopseudomonas?palustris）6種菌組成，經(jīng)過三級液體發(fā)酵，再將擴(kuò)大培養(yǎng)發(fā)酵菌液與麥麩均勻混合，經(jīng)固體發(fā)酵，低溫干燥而制備的調(diào)整禽畜腸道菌群結(jié)構(gòu)的益生菌菌劑。

這種調(diào)整禽畜腸道菌群益生菌菌劑的制備方法包括以下步驟：

（1）按微生物發(fā)酵工程工藝，先將斜面保存產(chǎn)朊假絲酵母菌種用馬鈴薯培養(yǎng)基PDA活化，經(jīng)三級逐級擴(kuò)大培養(yǎng)，制備成產(chǎn)朊假絲酵母的一級種子菌液；同理，糞鏈球菌、枯草芽孢桿菌、納豆芽孢桿菌、植物乳桿菌和沼澤紅假單胞菌5種細(xì)菌分別用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基活化，經(jīng)過三級逐級擴(kuò)大培養(yǎng)，制備成糞鏈球菌等5種細(xì)菌的一級種子菌液；

（2）將產(chǎn)朊假絲酵母和糞鏈球菌、枯草芽孢桿菌、納豆芽孢桿菌、植物乳桿菌和沼澤紅假單胞菌5種細(xì)菌的一級種子菌液用玉米粉-豆粕-馬鈴薯-蔗糖培養(yǎng)基進(jìn)行二級、三級擴(kuò)大培養(yǎng)；

所述二級擴(kuò)大培養(yǎng)條件：?將熱帶假絲酵母和糞鏈球菌、枯草芽孢桿菌、納豆芽孢桿菌、植物乳桿菌和沼澤紅假單胞菌5種細(xì)菌的一級種子液等體積混合，按接種量質(zhì)量比1:10?的6種菌的一級種子混合菌液，溫度30℃，轉(zhuǎn)速100-200r/min，,壓力0.05MPa，發(fā)酵20-24h，?在無菌條件下抽取10mL發(fā)酵液，稀釋100倍，檢查波長660nm吸光值OD，OD達(dá)到0.6-0.8后，再轉(zhuǎn)入三級擴(kuò)大培養(yǎng)階段；

所述三級擴(kuò)大培養(yǎng)條件：按接種量質(zhì)量比1:10二級擴(kuò)大培養(yǎng)液，溫度28-30℃，轉(zhuǎn)速200-300r/min，壓力0.05MPa，發(fā)酵20-24h,?抽取10mL發(fā)酵液，稀釋100倍，檢查波長660nmOD值，OD達(dá)到0.6-0.8后，停止培養(yǎng)，有效菌菌落數(shù)用平板稀釋法在1*10¹⁰cfu.mL^-1以上，cfu-菌落數(shù)。

這種調(diào)整禽畜腸道菌群益生菌菌劑的制備方法，所述玉米粉-豆粕-馬鈴薯-蔗糖培養(yǎng)基組成按質(zhì)量份數(shù)為：玉米粉20-30份，豆粕1-2份，馬鈴薯10-20份，蔗糖2份，氯化鈉0.5份，磷酸氫二鉀0.5份，硝酸鉀10份，硫酸鎂0.5份，硫酸亞鐵0.002份，自來水1000份，用過飽和氫氧化鈣調(diào)節(jié)pH值7.4-7.6。

這種調(diào)整禽畜腸道菌群益生菌菌劑的制備方法，所述菌劑所用菌種安全、可靠，購買于中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)農(nóng)業(yè)微生物中心，都是農(nóng)業(yè)部飼料添加劑允許使用菌種。發(fā)酵生產(chǎn)過程中全部用不銹鋼發(fā)酵罐完成，無廢氣、廢物、廢水產(chǎn)生，無重金屬污染。產(chǎn)品作為飼料添加劑，符合農(nóng)業(yè)部有關(guān)飼料添加劑的標(biāo)準(zhǔn)要求。