[發明專利]調整禽畜腸道菌群益生菌微生物菌劑及制備方法

無效

• 申請號: 201310027976.3
• 申請日: 2013-01-25
• 公開（公告）號: CN103060247A
• 公開（公告）日: 2013-04-24
• 發明（設計）人: 張清敏;趙穎
• 申請（專利權）人: 趙穎;昆明華曦飼料有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/16;A23K1/16;A23K1/18;C12R1/72;C12R1/46;C12R1/125;C12R1/07;C12R1/25;C12R1/01
• 代理公司: 昆明今威專利商標代理有限公司 53115
• 代理人: 賽曉剛

1.一種調整禽畜腸道菌群益生菌微生物菌劑，其特征在于：由產朊假絲酵母（Candida?utilis）、糞鏈球菌（Streptococcus?feacalis）、枯草芽孢桿菌（Bacillus?subtilis）、納豆芽孢桿菌（Bacillus?natto）、植物乳桿菌（Lactobacillus?plantarum）和沼澤紅假單胞菌（Rhodopseudomonaspalustris）6種菌組成，經過三級液體發酵，再將擴大培養發酵菌液與麥麩均勻混合，經固體發酵，低溫干燥而制備的調整禽畜腸道菌群結構的益生菌菌劑。

2.根據權利要求1所述的調整禽畜腸道菌群益生菌菌劑的制備方法，其特征在于包括以下步驟：

（1）按微生物發酵工程工藝，先將斜面保存產朊假絲酵母菌種用馬鈴薯培養基（PDA）活化，經三級逐級擴大培養，制備成產朊假絲酵母的一級種子菌液；同理，糞鏈球菌、枯草芽孢桿菌、納豆芽孢桿菌、植物乳桿菌和沼澤紅假單胞菌5種細菌分別用牛肉膏蛋白胨培養基活化，經過三級逐級擴大培養，制備成糞鏈球菌等5種細菌的一級種子菌液；

（2）將產朊假絲酵母和糞鏈球菌、枯草芽孢桿菌、納豆芽孢桿菌、植物乳桿菌和沼澤紅假單胞菌5種細菌的一級種子菌液用玉米粉-豆粕-馬鈴薯-蔗糖培養基進行二級、三級擴大培養；

所述二級擴大培養條件：?將熱帶假絲酵母和糞鏈球菌、枯草芽孢桿菌、納豆芽孢桿菌、植物乳桿菌和沼澤紅假單胞菌5種細菌的一級種子液等體積混合，按接種量質量比1:10?的6種菌的一級種子混合菌液，溫度30℃，轉速100-200r/min，,壓力0.05MPa，發酵20-24h，?在無菌條件下抽取10mL發酵液，稀釋100倍，檢查波長660nm吸光值OD，OD達到0.6-0.8后，再轉入三級擴大培養階段；

所述三級擴大培養條件：按接種量質量比1:10二級擴大培養液，溫度28-30℃，轉速200-300r/min，壓力0.05MPa，發酵20-24h,?抽取10mL發酵液，稀釋100倍，檢查波長660nmOD值，OD達到0.6-0.8后，停止培養，有效菌菌落數用平板稀釋法在1*10¹⁰cfu.mL^-1以上，cfu-菌落數。

3.根據權利要求2所述的調整禽畜腸道菌群益生菌菌劑的制備方法，其特征在于：所述玉米粉-豆粕-馬鈴薯-蔗糖培養基組成按質量份數為：玉米粉20-30份，豆粕1-2份，馬鈴薯10-20份，蔗糖2份，氯化鈉0.5份，磷酸氫二鉀0.5份，硝酸鉀10份，硫酸鎂0.5份，硫酸亞鐵0.002份，自來水1000份，用過飽和氫氧化鈣調節pH值7.4-7.6。

4.根據權利要求2所述的調整禽畜腸道菌群益生菌菌劑的制備方法，其特征在于：發酵生產過程中全部用不銹鋼發酵罐完成。