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[發(fā)明專利]一種從鐵皮石斛中提取多種活性成分的方法有效

專利信息
申請(qǐng)?zhí)枺?/td> 201310026291.7 申請(qǐng)日: 2013-01-24
公開(公告)號(hào): CN103113483A 公開(公告)日: 2013-05-22
發(fā)明(設(shè)計(jì))人: 榮龍;李嬌;原琳;榮永海 申請(qǐng)(專利權(quán))人: 北京航空航天大學(xué)
主分類號(hào): C08B37/00 分類號(hào): C08B37/00;A61K36/8984;A61P35/00;A61P29/00;A61P1/00;A61P9/00;A61P37/04
代理公司: 北京永創(chuàng)新實(shí)專利事務(wù)所 11121 代理人: 姜榮麗
地址: 100191*** 國(guó)省代碼: 北京;11
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摘要:
搜索關(guān)鍵詞: 一種 鐵皮 石斛 提取 多種 活性 成分 方法
【權(quán)利要求書】:

1.一種從鐵皮石斛中提取多種活性成分的方法,其特征在于,包括以下步驟:

第一步:材料預(yù)處理:

稱量鐵皮石斛,粉碎,按照固液比為1:10~1:20g/ml加入超純水;

第二步:破碎后的鐵皮石斛進(jìn)行閃提,得到鐵皮石斛粗提液;

第三步:將粗提液離心:

將閃提后的粗提液進(jìn)行離心,多糖存在于離心后的上清液A中,生物堿存在于離心后的沉淀A中;

第四步:上清液A中提取游離多糖;

第五步,沉淀A中提取結(jié)合多糖和生物堿。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從鐵皮石斛中提取活性成分的方法,其特征在于:第一步中所述的鐵皮石斛為-20℃冷凍保存的鐵皮石斛鮮品,固液比為1:15g/ml。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從鐵皮石斛中提取活性成分的方法,其特征在于:所述的第二步采用的閃提,按照閃提時(shí)間2min,閃提轉(zhuǎn)速3500~4000rpm的條件進(jìn)行提取,得到鐵皮石斛粗提液。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從鐵皮石斛中提取活性成分的方法,其特征在于:所述的第三步中離心的條件為轉(zhuǎn)速為5000rpm,離心15min。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從鐵皮石斛中提取多種活性成分的方法,其特征在于:第四步具體包括如下步驟:

步驟4.1:上清液A濃縮,得到濃縮液;

步驟4.2:醇沉得到多糖粗提物;

步驟4.3:多糖三脫水,得到游離多糖。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種從鐵皮石斛中提取多種活性成分的方法,其特征在于:所述的多糖三脫水具體為:

(a)在醇沉后得到的沉淀多糖粗提物中加入無水乙醇,充分?jǐn)嚢枋谷芤壕鶆?,離心,得到一次上清液和一次沉淀;

(b)在一次沉淀中加入無水丙酮,充分?jǐn)嚢韬筮M(jìn)行離心,得到二次上清夜和二次沉淀;

(c)在二次沉淀中加入無水乙醚,離心,離心后分離出三次沉淀,三次沉淀干燥后得游離多糖。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種從鐵皮石斛中提取多種活性成分的方法,其特征在于:所述離心的條件為:轉(zhuǎn)速11000rpm,離心15min。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從鐵皮石斛中提取多種活性成分的方法,其特征在于:所述的第五步具體包括如下步驟:

將第三步中對(duì)粗提液離心得到的沉淀A中加入純水,按照沉淀質(zhì)量0.6%加入纖維素酶,按照沉淀質(zhì)量1.5%加入木瓜蛋白酶,然后調(diào)節(jié)至PH=5,置于水浴鍋中,溫度為50℃,攪拌器攪拌,反應(yīng)1.5h;完成后,將反應(yīng)后的溶液加熱至沸騰,并且保持沸騰狀態(tài)3min;然后離心,轉(zhuǎn)速5000rpm,時(shí)間15min,結(jié)合多糖存在于離心后的上清液B中,保存離心后的沉淀B;取上清液B中提取結(jié)合多糖,轉(zhuǎn)步驟5.1;在沉淀B中提取生物堿,轉(zhuǎn)步驟5.2;

步驟5.1,提取結(jié)合多糖:

取上清液B加入乙醇,直至最終溶液中的乙醇體積濃度達(dá)到80%,放置1.5h,離心,分離出的沉淀C即為結(jié)合多糖,最后進(jìn)行三脫水,得到結(jié)合多糖;

步驟5.2,提取生物堿:

取沉淀B,加入純度為90%的乙醇,離心取上清液C;將上清液C加入三氯甲烷,三氯甲烷揮發(fā)后得到凝固狀的生物堿。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的一種從鐵皮石斛中提取多種活性成分的方法,其特征在于:所述的步驟5.2中,沉淀B先進(jìn)行堿化處理后再加入乙醇,并且在上清液C中加入三氯甲烷前,還包括對(duì)上清液C濃縮的步驟。

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