[發明專利]一種從鐵皮石斛中提取多種活性成分的方法

有效

• 申請號: 201310026291.7
• 申請日: 2013-01-24
• 公開（公告）號: CN103113483A
• 公開（公告）日: 2013-05-22
• 發明（設計）人: 榮龍;李嬌;原琳;榮永海
• 申請（專利權）人: 北京航空航天大學
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;A61K36/8984;A61P35/00;A61P29/00;A61P1/00;A61P9/00;A61P37/04
• 代理公司: 北京永創新實專利事務所 11121
• 代理人: 姜榮麗

1.一種從鐵皮石斛中提取多種活性成分的方法，其特征在于，包括以下步驟：

第一步：材料預處理：

稱量鐵皮石斛，粉碎，按照固液比為1:10~1:20g/ml加入超純水；

第二步：破碎后的鐵皮石斛進行閃提，得到鐵皮石斛粗提液；

第三步：將粗提液離心：

將閃提后的粗提液進行離心，多糖存在于離心后的上清液A中，生物堿存在于離心后的沉淀A中；

第四步：上清液Ａ中提取游離多糖；

第五步，沉淀Ａ中提取結合多糖和生物堿。

2.根據權利要求1所述的一種從鐵皮石斛中提取活性成分的方法，其特征在于：第一步中所述的鐵皮石斛為-20℃冷凍保存的鐵皮石斛鮮品，固液比為1:15g/ml。

3.根據權利要求1所述的一種從鐵皮石斛中提取活性成分的方法，其特征在于：所述的第二步采用的閃提，按照閃提時間2min，閃提轉速3500~4000rpm的條件進行提取，得到鐵皮石斛粗提液。

4.根據權利要求1所述的一種從鐵皮石斛中提取活性成分的方法，其特征在于：所述的第三步中離心的條件為轉速為5000rpm，離心15min。

5.根據權利要求1所述的一種從鐵皮石斛中提取多種活性成分的方法，其特征在于：第四步具體包括如下步驟：

步驟4.1：上清液A濃縮，得到濃縮液；

步驟4.2：醇沉得到多糖粗提物；

步驟4.3：多糖三脫水，得到游離多糖。

6.根據權利要求5所述的一種從鐵皮石斛中提取多種活性成分的方法，其特征在于：所述的多糖三脫水具體為：

(a)在醇沉后得到的沉淀多糖粗提物中加入無水乙醇，充分攪拌使溶液均勻，離心，得到一次上清液和一次沉淀；

(b)在一次沉淀中加入無水丙酮，充分攪拌后進行離心，得到二次上清夜和二次沉淀；

(c)在二次沉淀中加入無水乙醚，離心，離心后分離出三次沉淀，三次沉淀干燥后得游離多糖。

7.根據權利要求6所述的一種從鐵皮石斛中提取多種活性成分的方法，其特征在于：所述離心的條件為：轉速11000rpm，離心15min。

8.根據權利要求1所述的一種從鐵皮石斛中提取多種活性成分的方法，其特征在于：所述的第五步具體包括如下步驟：

將第三步中對粗提液離心得到的沉淀A中加入純水，按照沉淀質量0.6%加入纖維素酶，按照沉淀質量1.5%加入木瓜蛋白酶，然后調節至PH=5，置于水浴鍋中，溫度為50℃，攪拌器攪拌，反應1.5h；完成后，將反應后的溶液加熱至沸騰，并且保持沸騰狀態3min；然后離心，轉速5000rpm，時間15min，結合多糖存在于離心后的上清液B中，保存離心后的沉淀B；取上清液B中提取結合多糖，轉步驟5.1；在沉淀B中提取生物堿，轉步驟5.2；

步驟5.1，提取結合多糖：

取上清液B加入乙醇，直至最終溶液中的乙醇體積濃度達到80%，放置1.5h，離心，分離出的沉淀C即為結合多糖，最后進行三脫水，得到結合多糖；

步驟5.2，提取生物堿：

取沉淀B，加入純度為90%的乙醇，離心取上清液C；將上清液C加入三氯甲烷，三氯甲烷揮發后得到凝固狀的生物堿。

9.根據權利要求8所述的一種從鐵皮石斛中提取多種活性成分的方法，其特征在于：所述的步驟5.2中，沉淀B先進行堿化處理后再加入乙醇，并且在上清液C中加入三氯甲烷前，還包括對上清液C濃縮的步驟。