[發明專利]一種從鐵皮石斛中提取多種活性成分的方法有效
| 申請號: | 201310026291.7 | 申請日: | 2013-01-24 |
| 公開(公告)號: | CN103113483A | 公開(公告)日: | 2013-05-22 |
| 發明(設計)人: | 榮龍;李嬌;原琳;榮永海 | 申請(專利權)人: | 北京航空航天大學 |
| 主分類號: | C08B37/00 | 分類號: | C08B37/00;A61K36/8984;A61P35/00;A61P29/00;A61P1/00;A61P9/00;A61P37/04 |
| 代理公司: | 北京永創新實專利事務所 11121 | 代理人: | 姜榮麗 |
| 地址: | 100191*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 鐵皮 石斛 提取 多種 活性 成分 方法 | ||
1.一種從鐵皮石斛中提取多種活性成分的方法,其特征在于,包括以下步驟:
第一步:材料預處理:
稱量鐵皮石斛,粉碎,按照固液比為1:10~1:20g/ml加入超純水;
第二步:破碎后的鐵皮石斛進行閃提,得到鐵皮石斛粗提液;
第三步:將粗提液離心:
將閃提后的粗提液進行離心,多糖存在于離心后的上清液A中,生物堿存在于離心后的沉淀A中;
第四步:上清液A中提取游離多糖;
第五步,沉淀A中提取結合多糖和生物堿。
2.根據權利要求1所述的一種從鐵皮石斛中提取活性成分的方法,其特征在于:第一步中所述的鐵皮石斛為-20℃冷凍保存的鐵皮石斛鮮品,固液比為1:15g/ml。
3.根據權利要求1所述的一種從鐵皮石斛中提取活性成分的方法,其特征在于:所述的第二步采用的閃提,按照閃提時間2min,閃提轉速3500~4000rpm的條件進行提取,得到鐵皮石斛粗提液。
4.根據權利要求1所述的一種從鐵皮石斛中提取活性成分的方法,其特征在于:所述的第三步中離心的條件為轉速為5000rpm,離心15min。
5.根據權利要求1所述的一種從鐵皮石斛中提取多種活性成分的方法,其特征在于:第四步具體包括如下步驟:
步驟4.1:上清液A濃縮,得到濃縮液;
步驟4.2:醇沉得到多糖粗提物;
步驟4.3:多糖三脫水,得到游離多糖。
6.根據權利要求5所述的一種從鐵皮石斛中提取多種活性成分的方法,其特征在于:所述的多糖三脫水具體為:
(a)在醇沉后得到的沉淀多糖粗提物中加入無水乙醇,充分攪拌使溶液均勻,離心,得到一次上清液和一次沉淀;
(b)在一次沉淀中加入無水丙酮,充分攪拌后進行離心,得到二次上清夜和二次沉淀;
(c)在二次沉淀中加入無水乙醚,離心,離心后分離出三次沉淀,三次沉淀干燥后得游離多糖。
7.根據權利要求6所述的一種從鐵皮石斛中提取多種活性成分的方法,其特征在于:所述離心的條件為:轉速11000rpm,離心15min。
8.根據權利要求1所述的一種從鐵皮石斛中提取多種活性成分的方法,其特征在于:所述的第五步具體包括如下步驟:
將第三步中對粗提液離心得到的沉淀A中加入純水,按照沉淀質量0.6%加入纖維素酶,按照沉淀質量1.5%加入木瓜蛋白酶,然后調節至PH=5,置于水浴鍋中,溫度為50℃,攪拌器攪拌,反應1.5h;完成后,將反應后的溶液加熱至沸騰,并且保持沸騰狀態3min;然后離心,轉速5000rpm,時間15min,結合多糖存在于離心后的上清液B中,保存離心后的沉淀B;取上清液B中提取結合多糖,轉步驟5.1;在沉淀B中提取生物堿,轉步驟5.2;
步驟5.1,提取結合多糖:
取上清液B加入乙醇,直至最終溶液中的乙醇體積濃度達到80%,放置1.5h,離心,分離出的沉淀C即為結合多糖,最后進行三脫水,得到結合多糖;
步驟5.2,提取生物堿:
取沉淀B,加入純度為90%的乙醇,離心取上清液C;將上清液C加入三氯甲烷,三氯甲烷揮發后得到凝固狀的生物堿。
9.根據權利要求8所述的一種從鐵皮石斛中提取多種活性成分的方法,其特征在于:所述的步驟5.2中,沉淀B先進行堿化處理后再加入乙醇,并且在上清液C中加入三氯甲烷前,還包括對上清液C濃縮的步驟。
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