[發(fā)明專利]一種從鐵皮石斛中提取多種活性成分的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310026291.7
• 申請(qǐng)日: 2013-01-24
• 公開（公告）號(hào): CN103113483A
• 公開（公告）日: 2013-05-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 榮龍;李嬌;原琳;榮永海
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 北京航空航天大學(xué)
• 主分類號(hào): C08B37/00
• 分類號(hào): C08B37/00;A61K36/8984;A61P35/00;A61P29/00;A61P1/00;A61P9/00;A61P37/04
• 代理公司: 北京永創(chuàng)新實(shí)專利事務(wù)所 11121
• 代理人: 姜榮麗

1.一種從鐵皮石斛中提取多種活性成分的方法，其特征在于，包括以下步驟：

第一步：材料預(yù)處理：

稱量鐵皮石斛，粉碎，按照固液比為1:10~1:20g/ml加入超純水；

第二步：破碎后的鐵皮石斛進(jìn)行閃提，得到鐵皮石斛粗提液；

第三步：將粗提液離心：

將閃提后的粗提液進(jìn)行離心，多糖存在于離心后的上清液A中，生物堿存在于離心后的沉淀A中；

第四步：上清液Ａ中提取游離多糖；

第五步，沉淀Ａ中提取結(jié)合多糖和生物堿。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從鐵皮石斛中提取活性成分的方法，其特征在于：第一步中所述的鐵皮石斛為-20℃冷凍保存的鐵皮石斛鮮品，固液比為1:15g/ml。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從鐵皮石斛中提取活性成分的方法，其特征在于：所述的第二步采用的閃提，按照閃提時(shí)間2min，閃提轉(zhuǎn)速3500~4000rpm的條件進(jìn)行提取，得到鐵皮石斛粗提液。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從鐵皮石斛中提取活性成分的方法，其特征在于：所述的第三步中離心的條件為轉(zhuǎn)速為5000rpm，離心15min。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從鐵皮石斛中提取多種活性成分的方法，其特征在于：第四步具體包括如下步驟：

步驟4.1：上清液A濃縮，得到濃縮液；

步驟4.2：醇沉得到多糖粗提物；

步驟4.3：多糖三脫水，得到游離多糖。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種從鐵皮石斛中提取多種活性成分的方法，其特征在于：所述的多糖三脫水具體為：

(a)在醇沉后得到的沉淀多糖粗提物中加入無水乙醇，充分?jǐn)嚢枋谷芤壕鶆?，離心，得到一次上清液和一次沉淀；

(b)在一次沉淀中加入無水丙酮，充分?jǐn)嚢韬筮M(jìn)行離心，得到二次上清夜和二次沉淀；

(c)在二次沉淀中加入無水乙醚，離心，離心后分離出三次沉淀，三次沉淀干燥后得游離多糖。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種從鐵皮石斛中提取多種活性成分的方法，其特征在于：所述離心的條件為：轉(zhuǎn)速11000rpm，離心15min。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從鐵皮石斛中提取多種活性成分的方法，其特征在于：所述的第五步具體包括如下步驟：

將第三步中對(duì)粗提液離心得到的沉淀A中加入純水，按照沉淀質(zhì)量0.6%加入纖維素酶，按照沉淀質(zhì)量1.5%加入木瓜蛋白酶，然后調(diào)節(jié)至PH=5，置于水浴鍋中，溫度為50℃，攪拌器攪拌，反應(yīng)1.5h；完成后，將反應(yīng)后的溶液加熱至沸騰，并且保持沸騰狀態(tài)3min；然后離心，轉(zhuǎn)速5000rpm，時(shí)間15min，結(jié)合多糖存在于離心后的上清液B中，保存離心后的沉淀B；取上清液B中提取結(jié)合多糖，轉(zhuǎn)步驟5.1；在沉淀B中提取生物堿，轉(zhuǎn)步驟5.2；

步驟5.1，提取結(jié)合多糖：

取上清液B加入乙醇，直至最終溶液中的乙醇體積濃度達(dá)到80%，放置1.5h，離心，分離出的沉淀C即為結(jié)合多糖，最后進(jìn)行三脫水，得到結(jié)合多糖；

步驟5.2，提取生物堿：

取沉淀B，加入純度為90%的乙醇，離心取上清液C；將上清液C加入三氯甲烷，三氯甲烷揮發(fā)后得到凝固狀的生物堿。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的一種從鐵皮石斛中提取多種活性成分的方法，其特征在于：所述的步驟5.2中，沉淀B先進(jìn)行堿化處理后再加入乙醇，并且在上清液C中加入三氯甲烷前，還包括對(duì)上清液C濃縮的步驟。