[發明專利]一種血漿腎素活性的測定方法及其應用無效
| 申請號： | 201310024180.2 | 申請日： | 2013-01-22 |
| 公開（公告）號： | CN103116017A | 公開（公告）日： | 2013-05-22 |
| 發明（設計）人： | 寧光;劉聰;王衛慶;蘇颋為;周薇薇;崔斌 | 申請（專利權）人： | 上海市內分泌代謝病研究所 |
| 主分類號： | G01N33/53 | 分類號： | G01N33/53;G01N33/531 |
| 代理公司： | 上海伯瑞杰知識產權代理有限公司 31227 | 代理人： | 吳瑾瑜 |
| 地址： | 200025 *** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 血漿 活性 測定 方法 及其 應用 | ||
1.一種血漿腎素活性的測定方法，其特征在于：其步驟為：
1）準備儲存液：
a、準備酶促反應抑制液：在小管內加入標注體積的去離子水，輕輕混勻，抑制液應貯存在2-8℃；
b、貯備沖洗液：把小管內液體倒入950ml去離子水中，混勻，貯存在2-8℃；
2）酶促反應-血管緊張素I的生成：
a、在200ul樣品血清中加入200ul預冷的酶促反應抑制液，輕輕混勻；
b、把每份混合液平均分成兩份200ul，分別轉移到兩個小管中；
c、把第一份小管液放入4℃水浴中，振蕩孵育1小時，用來測定血管緊張素I的基礎濃度；
d、把第二份小管液放入37℃水浴中，振蕩孵育1小時，用來測定生成的血管緊張素I濃度；
e、孵育結束，把第二份小管液從37℃迅速降溫至4℃；
3）免疫測定：
在抗體包被管內依次加入50ul標準品、50ul經37℃和4℃孵育的三份樣品加入示蹤劑200ul，混勻；18-25℃振蕩孵育2小時，振速大于280rpm；除空白管外，終止孵育；用2ml沖洗液沖洗；終止兩次；測定活性一分鐘；
標準曲線：以B/T(%)或B/B0(%)的自然對數為橫坐標，以標準品的血管緊張素I濃度為橫坐標作圖；
樣品血清：對應樣品37℃或4℃各自位于橫坐標的B/T(%)或B/B0(%)自然對數值，讀出縱坐標相應的血管緊張素I濃度；
計算血漿腎素活性：血漿腎素活性是間接測定每小時體外生成血管緊張素I的量；由37℃生成的血管緊張素I濃度減去4℃的基礎濃度得到。
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