[發明專利]一種用于檢測多巴胺的金納米粒摻雜的分子印記電化學傳感器的制備方法

無效

• 申請號: 201310023869.3
• 申請日: 2013-01-23
• 公開（公告）號: CN103760208A
• 公開（公告）日: 2014-04-30
• 發明（設計）人: 周學敏;姜慧君;薛誠;韓青;文婷婷;汪洋;王若禹
• 申請（專利權）人: 南京醫科大學
• 主分類號: G01N27/416
• 分類號: G01N27/416;G01N27/333
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 李紀昌

技術領域

本發明屬于分析檢測技術領域，具體涉及一種用于檢測多巴胺的金納米粒摻雜的分子印記電化學傳感器的制備方法。

背景技術

????多巴胺（DA）是下丘腦和腦垂體腺中的一種重要的神經遞質，用來幫助細胞傳送生物電信號的化學物質，在中樞神經，腎和內分泌系統中起著重要作用。腦內多巴胺神經功能失調是帕金森病、亨廷頓氏舞蹈病和精神分裂癥等病癥的重要病因。所以，對多巴胺測定方法的研究，對探討其生理活性和相關疾病的診斷具有重要意義。現有的檢測多巴胺的方法主要有：分光光度法、微透析法、離子色譜法、化學發光法、高效液相色譜法和GC-MS法等。

電化學傳感器是一種重要的電子器件，因其設計簡單、靈敏度高、價格低廉等優點，被廣泛用于人體檢測、臨床診斷、環境分析、食品分析和產品檢測等，越來越受到人們的關注。分子印記屬于超分子化學中主客體化學范疇，來源于高分子化學與材料化學學科交叉的綜合學科。分子印記技術是一種制備具有特異選擇性或專一選擇性聚合物的技術，具有構效預定性、特異識別性和廣泛適用性等三大突出優點。目前電聚合分子印記傳感器敏感膜已有公開的報道，用分子印記方法富集檢測多巴胺已有文獻報道。Xianwen?Kan等人在文獻（J.?Phys.?Chem.?C，2008,?112,?4849-4854）中提出了一種利用碳納米管結合分子印記技術來富集檢測多巴胺含量的方法，Tien-Chun?Tsai等人在文獻（Sensors?and?Actuators?B，2012，171-?172，93-101）中提出了一種利用分子印記電化學傳感器在生物樣品中檢測多巴胺含量的方法，但是這些方法的檢測靈敏度低，不能準確地檢測生物樣品中多巴胺的含量。

由于多巴胺存在于復雜基質中，含量低、分析檢測難度大，其痕量分析仍是目前亟待解決的問題。現有的測定方法都存在樣品處理方法復雜、成本高等問題，因此，建立簡便、低成本、高靈敏度和高選擇性的多巴胺檢測方法，對加快分析檢測技術發展具有重要意義。結合分子印記技術的優良選擇性進行樣品前處理可實現痕量目標物的快速富集。曾有報道以分子印記技術結合傳統分析方法檢測復雜樣品中的多巴胺，雖然可提高檢測的靈敏度和準確性，但仍然面臨樣品處理復雜、耗時多的缺點。電化學傳感器最大的優勢在于靈敏度高、方便快捷，可以實現實時檢測。傳統的電化學檢測多數局限于本身具有電化學活性的待測物，與分子印記相結合的電化學傳感器有望突破傳統的局限，可通過待測目標物與特異性孔穴結合阻塞探針分子的通路產生電化學響應。但電聚合到電極上的分子印記層多為不導電或弱導電物質，大大影響了傳感器的靈敏度。如何克服現有技術的不足已成為分析檢測技術領域中亟待解決的重點難題。

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發明內容

本發明的目的在于克服現有技術的不足而是提供一種用于檢測多巴胺的金納米粒摻雜的分子印記電化學傳感器的制備方法，該方法具有綜合電化學傳感器與金納米粒摻雜的印記聚合物的優點，構筑用于檢測多巴胺的金納米粒摻雜的分子印記電化學傳感器，以實現對生物樣品中多巴胺的高靈敏度及快速檢測。

根據本發明提出的一種用于檢測多巴胺的金納米粒摻雜的分子印記電化學傳感器的制備方法，其特征在于包括以下步驟：

步驟一，金電極預處理：將金電極拋光，先依次用乙醇和水超聲清洗，然后應用循環伏安法（CV）在硫酸溶液中掃描至圖形穩定，最后用雙蒸水淋洗并用氮氣吹干；

步驟二，金納米粒自組裝修飾電極制備：將步驟一預處理后的金電極浸入到含氨基苯硫酚的乙醇溶液中，進行自組裝后沖洗干凈并吹干；再將其浸入至金納米溶膠中，浸漬后洗凈、吹干，得到金納米自組裝修飾電極；

步驟三，分子印記自組裝溶液配制：配制含功能化金納米粒、氨基苯硫酚和多巴胺的乙醇/HAC-NaAC緩沖液，將該緩沖液用氮氣除氧后密封，在室溫和避光環境下放置3～12h，得到分子印記自組裝溶液；其中，多巴胺與功能化金納米粒的摩爾濃度比為1:1～1:50，多巴胺與氨基苯硫酚的摩爾濃度比為1:1～1:30；

步驟四，電聚合反應：將步驟三得到的分子印記自組裝溶液倒入反應容器中，避光、通氮氣后，插入步驟二得到的AuNPs自組裝修飾的金電極，于0.2～1.5V電位下，進行計時電流電聚合300～800s，然后取出、淋洗和吹干；

步驟五，模板分子洗脫：將步驟四得到的電極浸入硫酸溶液中，在-0.8～+0.4V電位下處理200～500s，得到檢測多巴胺的金納米粒摻雜的分子印記電化學傳感器。