[發明專利]參芎葡萄糖注射液原料、中間體及其制劑的指紋圖譜建立方法和質量控制方法

有效

• 申請號: 201310021486.2
• 申請日: 2013-01-21
• 公開（公告）號: CN103149310A
• 公開（公告）日: 2013-06-12
• 發明（設計）人: 葉湘武;鄭林;王永林;蘭燕宇
• 申請（專利權）人: 貴州景峰注射劑有限公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 上海天翔知識產權代理有限公司 31224
• 代理人: 呂伴

1.參芎葡萄糖注射液原料的指紋圖譜的建立方法，其特征在于，由以下步驟組成：

（1）、對照品溶液的制備：精密稱取丹參素鈉、原兒茶醛、丹酚酸D、迷迭香酸、丹酚酸B、丹酚酸A適量，加甲醇溶解，稀釋制成濃度分別為1mg·mL-1的對照品溶液；

（2）、供試品溶液的制備：取丹參藥材用水、甲醇或乙醇中的至少一種溶劑提出，定容得丹參藥材供試品溶液；

（3）、供試品溶液的測定：吸取供試品溶液注入高效液相色譜儀進行測定，得到丹參藥材的指紋圖譜；指紋圖譜檢測的色譜條件為：十八烷基硅烷鍵合硅膠為色譜柱填充劑；乙腈(A)-磷酸水溶液(B)為流動相進行梯度洗脫；檢測波長為200～300nm；柱溫為35℃～55℃；進樣量為5～15μL；流速為0.5～1.0mL·min^-1；

（4）、對照指紋圖譜的建立：通過對10批次以上丹參藥材的指紋圖譜進行測定，確定其共有指紋特征峰，并經中藥指紋圖譜相似度評價軟件擬合建立丹參藥材對照指紋圖譜。

2.如權利要求1所述的參芎葡萄糖注射液原料的指紋圖譜的建立方法，其特征在于，所述步驟（2）供試品溶液的制備過程具體如下：取過40目篩丹參藥材粉末0.5g，精密稱定，精密加入水25ml，稱定重量，加熱回流提取2h，放冷再稱定重量，用水補足減失的重量，搖勻，上清液用0.45μm微孔濾膜濾過，取續濾液，即得丹參藥材供試品溶液。

3.如權利要求1所述的參芎葡萄糖注射液原料的指紋圖譜的建立方法，其特征在于，所述步驟（3）供試品溶液的測定中，所述測定具體為：DiamonsilC₁₈色譜柱（4.6mm×250mm，5μm）；流動相乙腈（A）-0.05％磷酸（B），流速1mL·min^-1，梯度洗脫，0～7min，A2%～4%；7～12min，A4%～18%；12～15min，A18%～20%；15～22min，A20%～23%；22～32min，A23%～32%；32～42min，A32%～35%；42～50min，A35%～90%；50～60min，A90%；柱溫40℃，檢測波長230nm，進樣量10μL；記錄60min色譜圖，即得到所需的丹參藥材指紋圖譜。

4.如權利要求1所述的參芎葡萄糖注射液原料的指紋圖譜的建立方法，其特征在于，所述步驟（3）供試品溶液的測定中，在丹參藥材指紋圖譜中，以第15號峰丹酚酸B的峰面積最大，以丹酚酸B的保留時間為參照，計算各共有峰的相對保留時間:第1號共有峰的相對保留時間為0.097±0.001min；第2號共有峰的相對保留時間為0.111±0.001min；第3號共有峰的相對保留時間為0.123±0.001min；第4號共有峰的相對保留時間為0.198±0.002min；第5號共有峰的相對保留時間為0.234±0.002min；第6號共有峰的相對保留時間為0.271±0.003min；第7號共有峰的相對保留時間為0.472±0.005min；第8號共有峰的相對保留時間為0.491±0.005min；第9號共有峰的相對保留時間為0.662±0.007min；第10號共有峰的相對保留時間為0.687±0.007min；第11號共有峰的相對保留時間為0.788±0.008min；第12號共有峰的相對保留時間為0.813±0.008min；第13號共有峰的相對保留時間為0.877±0.009min；第14號共有峰的相對保留時間為0.914±0.009min；第15號共有峰的相對保留時間為1min；第16號共有峰的相對保留時間為1.047±0.01min；第16號共有峰的相對保留時間為1.076±0.01min。

5.如權利要求1所述的參芎葡萄糖注射液原料的指紋圖譜的建立方法，其特征在于，所述步驟4對照指紋圖譜的建立中，在丹參藥材指紋圖譜中確定了17個特征峰，其中峰5、7、13、14、15、17分別依次為丹參素、原兒茶醛、丹酚酸D、迷迭香酸、丹酚酸B、丹酚酸A。

6.如權利要求1所述的參芎葡萄糖注射液原料的指紋圖譜的建立方法，其特征在于，所述步驟（4）對照指紋圖譜的建立中，采用國家藥典委員會編制的“中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統（2004版）”對所得數據和圖譜進行處理即得到對照指紋圖譜。