[發(fā)明專利]耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)疫苗重組蛋白抗原I1C及制備方法和應(yīng)用有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201310021212.3 | 申請(qǐng)日: | 2013-01-21 |
| 公開(kāi)(公告)號(hào): | CN103087198A | 公開(kāi)(公告)日: | 2013-05-08 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 鄒全明;樊紹文;曾浩;馮強(qiáng);吳翼;蔡昌芝;郭鷹 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 重慶原倫生物科技有限公司;中國(guó)人民解放軍第三軍醫(yī)大學(xué) |
| 主分類號(hào): | C07K19/00 | 分類號(hào): | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/63;C12N1/21;A61K39/085;A61P31/04;G01N33/68;C12R1/19;C12R1/445 |
| 代理公司: | 重慶志合專利事務(wù)所 50210 | 代理人: | 胡榮琿 |
| 地址: | 401121 重慶市北部新*** | 國(guó)省代碼: | 重慶;85 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 耐甲氧 西林 金黃色 葡萄球菌 mrsa 疫苗 重組 蛋白 抗原 i1c 制備 方法 應(yīng)用 | ||
1.一種重組融合蛋白I1C,其特征在于:該融合蛋白由MRSA鐵離子表面決定蛋白IsdB的一個(gè)活性片段I1與ClfA抗原分子的一個(gè)活性片段C通過(guò)連接肽融合而成。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的重組蛋白I1C,其特征在于,該蛋白的氨基酸序列如SEQ?ID?NO:1所示,核酸序列如SEQ?ID?NO:2所示。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的重組蛋白I1C,其特征在于,所述活性片段I1的核酸序列如SEQ?ID?NO:3所示,氨基酸序列如SEQ?ID?NO:4所示。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的重組蛋白I1C,其特征在于,所述ClfA抗原分子活性片段C的核酸序列如SEQ?ID?NO:5所示,氨基酸序列如SEQ?ID?NO:6所示。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的重組蛋白I1C,其特征在于,所述連接肽氨基酸序列結(jié)構(gòu)為-(GGGGS)n-,或-(GGSGG)n-,或(YAPVDV)n-,或-(YVPVDV)n-,所述n為1。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的重組蛋白I1C,其特征在于,所述連接肽氨基酸序列結(jié)構(gòu)為-YVPVDV-。
7.權(quán)利要求1所述的重組融合蛋白I1C的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:
1)全基因合成,以獲得編碼I1C的DNA序列;
2)將所獲得的I1C基因片段克隆至表達(dá)載體,然后轉(zhuǎn)化至宿主菌,誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化后的宿主菌表達(dá)重組蛋白I1C。
8.一種表達(dá)載體,其特征在于:包含編碼權(quán)利要求1所述重組蛋白I1C的核酸序列。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的表達(dá)載體,其特征在于,所述表達(dá)載體是pGex系列載體,或pET系列載體,或pQE系列載體,優(yōu)選為pGex-6P-2。
10.一種表達(dá)如權(quán)利要求8或9所述表達(dá)載體的宿主菌。
11.如權(quán)利要求10所述的宿主菌,其特征在于,所述宿主菌為大腸桿菌XL1-blue或BL21系列或HMS174系列,優(yōu)選為大腸桿菌XL1-blue。
12.權(quán)利要求1所述的重組蛋白在制備抗耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的亞單位疫苗中的應(yīng)用。
13.權(quán)利要求1所述的重組蛋白在制備耐甲氧西林金黃色葡萄球菌檢測(cè)試劑盒中的應(yīng)用。
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