[發(fā)明專利]一種用于細(xì)胞培養(yǎng)的多糖/Matrigel復(fù)合凝膠膜及其制備方法和應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310017639.6
• 申請日: 2013-01-17
• 公開（公告）號: CN103113627A
• 公開（公告）日: 2013-05-22
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李萌
• 申請（專利權(quán)）人: 黑龍江省重生生物科技有限公司
• 主分類號: C08L5/04
• 分類號: C08L5/04;C08L5/06;C08L5/08;C08L89/00;C08K3/16;C08J3/075;C12N5/071
• 代理公司: 北京科龍寰宇知識產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司 11139
• 代理人: 孫皓晨;費碧華

1.一種用于細(xì)胞培養(yǎng)的多糖/Matrigel復(fù)合凝膠膜，其特征在于以多糖和Matrigel為原料，采用鈣離子作為交聯(lián)劑，通過留延法制備。

2.如權(quán)利要求1所述的復(fù)合凝膠膜，其特征在于所述的多糖為海藻酸鹽、果膠、透明質(zhì)酸、硫酸軟骨素中一種或多種多糖的組合。

3.如權(quán)利要求1或2所述的復(fù)合凝膠膜，其特征在于所述的多糖/Matrigel復(fù)合凝膠膜是通過以下方法制備得到：

(1)稱取一定量多糖，將其溶于去離子水中，制備成質(zhì)量百分比濃度為0.1%-3%多糖溶液，攪拌直至全部溶解，備用；

(2)配制0.1M的氯化鈣溶液，過濾滅菌，備用；

(3)取一定體積的Matrigel溶液，在其中加入一定量的去離子水形成蛋白濃度為9-15mg/ml的Matrigel溶液，整個操作過程需在冰上操作；

(4)在超凈工作臺中量取步驟(1)制備的溶液5ml，在其中加入步驟(3)制備的Matrigel溶液0.1-8ml，加入0.5-5ml步驟(2)配制的氯化鈣溶液，混合攪拌，然后將其倒入細(xì)胞培養(yǎng)器皿或細(xì)胞培養(yǎng)板中，以上過程需在冰上操作，然后將其置于37℃培養(yǎng)箱中孵育2-5min，形成用于細(xì)胞培養(yǎng)的復(fù)合凝膠膜。

4.制備權(quán)利要求1-3任一項所述的多糖/Matrigel復(fù)合凝膠膜的方法，其特征在于包括以下步驟：

(1)稱取一定量多糖，將其溶于去離子水中，制備成質(zhì)量百分比濃度為0.1%-3%多糖溶液，攪拌直至全部溶解，備用；

(2)配制0.1M的氯化鈣溶液，過濾滅菌，備用；

(3)取一定體積的Matrigel溶液，在其中加入一定量的去離子水形成蛋白濃度為9-15mg/ml的Matrigel溶液，整個操作過程需在冰上操作；

(4)在超凈工作臺中量取步驟(1)制備的溶液5ml，在其中加入步驟(3)制備的Matrigel溶液0.1-8ml，加入0.5-5ml步驟(2)配制的氯化鈣溶液，混合攪拌，然后將其倒入細(xì)胞培養(yǎng)器皿或細(xì)胞培養(yǎng)板中，以上過程需在冰上操作，然后將其置于37℃培養(yǎng)箱中孵育2-5min，形成用于細(xì)胞培養(yǎng)的復(fù)合凝膠膜。

5.如權(quán)利要求4所述的制備復(fù)合凝膠膜的方法，其特征在于步驟（1）所述的多糖為海藻酸鹽、果膠、透明質(zhì)酸、硫酸軟骨素中一種或多種多糖的組合。

6.權(quán)利要求1-3任一項所述的多糖/Matrigel復(fù)合凝膠膜在培養(yǎng)細(xì)胞中應(yīng)用。