[發明專利]一種白樺葉片基因組DNA提取方法

無效

• 申請號: 201310016274.5
• 申請日: 2013-01-17
• 公開（公告）號: CN103013985A
• 公開（公告）日: 2013-04-03
• 發明（設計）人: 魏志剛;楊傳平;張力杰;曲贊霜;候聰
• 申請（專利權）人: 東北林業大學
• 主分類號: C12N15/10
• 分類號: C12N15/10
• 代理公司: 北京科億知識產權代理事務所(普通合伙) 11350
• 代理人: 湯東鳳

1.一種白樺葉片基因組DNA提取方法，其特征在于，包括以下步驟：

①葉片在加液氮的研缽中研磨至細末后，加入300μL改良STE溶液，300μL改良CTAB溶液和20μLβ—巰基乙醇，混合后震蕩3min；改良CTAB溶液配方：2.5﹪（W/V）CTAB，150mmol/L?Tris-Cl（pH8.0），20mmol/L?EDTA（pH8.0），1.4mmol/L?NaCl；改良SET溶液配方：150mmol/L?Tris-Cl（pH8.0），20mmol/L?EDTA（pH8.0），1.4mmol/L?NaCl；

②常溫5000g離心5min,棄上清；向沉淀中加入加600μL改良CTAB溶液和20μLβ—巰基乙醇70℃水浴15min后16060g離心5min；

③取上清加入等體積氯仿充分混勻，16060g離心5min，重復此步驟1~2次；

④取上清加入等體積的無水乙醇:異丙醇混合液，無水乙醇:異丙醇的體積比為2:1，上下顛倒混合均勻后常溫下靜置3min，6080g離心3min；

⑤倒掉上清液，用70%預冷的乙醇洗滌2~3次，干燥后溶于50μL?TE或去離子水中；

⑥電泳檢測DNA的完整性，A260/280測定DNA濃度和純度。