[發(fā)明專利]鑒別馬立克氏病病毒血清1型疫苗毒的引物及試劑盒

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310014600.9
• 申請日: 2013-01-15
• 公開（公告）號: CN103131795A
• 公開（公告）日: 2013-06-05
• 發(fā)明（設計）人: 龍進學;張?zhí)?/a>;孫豐廷;鄭杰;張紅;楊國良;王亞麗;張凌云
• 申請（專利權）人: 北京華都詩華生物制品有限公司
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/93
• 代理公司: 北京路浩知識產(chǎn)權代理有限公司 11002
• 代理人: 王朋飛;張慶敏

1.一種用于鑒別馬立克氏病病毒血清1型疫苗毒的引物，其特征在于，其包括SEQ?ID?NO.1~2所示的核苷酸序列。

2.權利要求1所述的引物在鑒別馬立克氏病病毒血清1型疫苗毒中的應用。

3.含有權利要求1所述引物的鑒別馬立克氏病病毒血清1型疫苗毒的試劑盒。

4.如權利要求3所述的試劑盒，其特征在于，采用權利要求1所述引物進行PCR擴增后，有目的條帶擴增的樣品為馬立克氏病病毒血清1型疫苗毒陽性，否則為陰性。

5.如權利要求3或4所述的試劑盒，其特征在于，采用權利要求1所述引物進行PCR擴增后，只具有長度為250bp的擴增產(chǎn)物條帶的樣品為馬立克氏病病毒血清1型疫苗毒CVI988株，具有長度為250bp和750bp兩條特異產(chǎn)物條帶的樣品為馬立克氏病病毒血清1型疫苗毒814株。

6.如權利要求3或4所述的試劑盒，其特征在于，PCR反應條件為：95℃3min；94℃變性30sec，60℃退火30sec，72℃1min，循環(huán)40次；72℃10min。

7.一種鑒別馬立克氏病血清1型疫苗毒株的診斷試劑，其特征在于，包括權利要求1所述的引物。

8.如權利要求3所述的試劑盒，其特征在于，還包括一對核苷酸序列如SEQ?ID?NO.3~4所示的引物。

9.如權利要求8所述的試劑盒，其特征在于，其工作程序為：

1）對樣品DNA應用SEQ?ID?NO.3~4所示的引物進行一次PCR反應，具有長度為277bp的擴增產(chǎn)物條帶的樣品為馬立克氏病病毒陽性，否則為陰性；

2）對步驟1）陽性的樣品DNA應用權利要求1所述的引物再次進行PCR反應，只具有長度為250bp的擴增產(chǎn)物條帶的樣品為馬立克氏病病毒血清1型疫苗毒CVI988株，具有長度為250bp和750bp兩條特異產(chǎn)物條帶的樣品為馬立克氏病病毒血清1型疫苗毒814株。

10.如權利要求9所述的試劑盒，其特征在于，步驟1）中PCR反應條件為：94℃3min；94℃變性30sec，55℃退火30sec，72℃30s，循環(huán)35次；72℃10min。