[發(fā)明專利]一種芐氧羰基丙氨酰丙氨酸的制備方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310013700.X
• 申請日: 2013-01-15
• 公開（公告）號: CN103073618A
• 公開（公告）日: 2013-05-01
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 徐紅巖;李忠亮
• 申請（專利權(quán)）人: 吉爾生化（上海）有限公司;上海吉爾多肽有限公司;無錫亞肽生物科技有限公司
• 主分類號: C07K5/062
• 分類號: C07K5/062
• 代理公司: 上海浦東良風(fēng)專利代理有限責(zé)任公司 31113
• 代理人: 張勁風(fēng)

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種兩肽的制備方法，特別涉及一種芐氧羰基丙氨酰丙氨酸的制備方法。

背景技術(shù)

兩肽的合成是最簡單多肽合成中最簡單的，由一分子的游離氨基和一份子的游離羧基脫掉一分子的羧基，兩肽的合成尤其適用于液相合成，不同的氨基酸合成兩肽有不同的的縮合方法，1985年9月由科學(xué)出版社出版的《多肽合成》這本書中介紹了碳二亞胺法，活化酯法，混合酸酐法，疊氮物法等方法，具體應(yīng)用到兩個不同的氨基酸上，需要靈活運用，經(jīng)檢索，未發(fā)現(xiàn)同一序列的化合物的優(yōu)選方法，?芐氧羰基丙氨酰丙氨酸是一種常用的多肽，有多種方法可以完成，現(xiàn)有方法多產(chǎn)量不大，不適于工業(yè)化生產(chǎn)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種芐氧羰基丙氨酰丙氨酸的制備方法，主要解決現(xiàn)有合成方法不適于工業(yè)化生產(chǎn)的技術(shù)問題。本發(fā)明的思路：芐氧羰基丙氨酸和丙氨酸甲酯鹽酸鹽由N,N'-二環(huán)己基碳二亞胺縮合得芐氧羰基丙氨酰丙氨酸甲酯，然后皂化，得到芐氧羰基丙氨酰丙氨酸。

本發(fā)明的技術(shù)方案：一種芐氧羰基丙氨酰丙氨酸的制備方法，其特征在于其制備具體步驟為，第一步反應(yīng)：將丙氨酸甲酯鹽酸鹽加入到二氯甲烷中，加入有機(jī)堿，物質(zhì)的量為丙氨酸甲酯鹽酸鹽的1~1.3倍，加入芐氧羰基丙氨酸，物質(zhì)的量為丙氨酸甲酯鹽酸鹽的0.8~1.2倍，冰浴，滴加N,N'-二環(huán)己基碳二亞胺的二氯甲烷溶液，與N,N'-二環(huán)己基碳二亞胺物質(zhì)的量為芐氧羰基丙氨酸1~1.2倍，反應(yīng)過夜（12-16小時），濾去二環(huán)己基脲，旋蒸去掉二氯甲烷，加入乙酸乙酯，碳酸氫鈉溶液洗滌有機(jī)層，稀鹽酸洗滌有機(jī)層，飽和食鹽水洗滌有機(jī)層，乙酸乙酯干燥，過濾，蒸干，得白色固體，重結(jié)晶，得芐氧羰基丙氨酰丙氨酸甲酯；第二步反應(yīng)：將芐氧羰基丙氨酰丙氨酸甲酯溶于酒精中，加入氫氧化鈉溶液，其物質(zhì)的量為芐氧羰基丙氨酸1~1.2倍，皂化，完畢后，濃縮，乙醚洗滌，加入乙酸乙酯，調(diào)pH值至酸性，乙酸乙酯提取，水洗有機(jī)層，有機(jī)層干燥，抽濾，濃縮，芐氧羰基丙氨酰丙氨酸析出，乙醚洗滌，得到產(chǎn)品。

所述有機(jī)堿選自胺類化合物、醇的堿金屬鹽、烷基金屬鋰化合物或胺基鋰化合物中的一種，優(yōu)選甲胺、乙醇鈉、丁基鋰或二異丙基胺基鋰中的一種。

本發(fā)明的有益效果：本發(fā)明根據(jù)具體的氨基酸序列和保護(hù)基團(tuán)特點，提供一種相應(yīng)的兩肽的的生產(chǎn)方法，經(jīng)研究分析，選擇了合適的氨基酸及縮合劑，合適的結(jié)晶重結(jié)晶方法，純度可達(dá)98%以上，收率達(dá)85%以上，適于工業(yè)化生產(chǎn)。

具體實施方式

實施例1：

將丙氨酸甲酯鹽酸鹽加入到二氯甲烷中，加入甲胺，物質(zhì)的量為丙氨酸甲酯鹽酸鹽的1倍，加入芐氧羰基丙氨酸，物質(zhì)的量為丙氨酸甲酯鹽酸鹽的0.8倍，冰浴，滴加N,N'-二環(huán)己基碳二亞胺的二氯甲烷溶液，與N,N'-二環(huán)己基碳二亞胺物質(zhì)的量為芐氧羰基丙氨酸1倍，反應(yīng)過夜，濾去二環(huán)己基脲，旋蒸去掉二氯甲烷，加入乙酸乙酯，碳酸氫鈉溶液洗滌有機(jī)層，稀鹽酸洗滌有機(jī)層，飽和食鹽水洗滌有機(jī)層，乙酸乙酯干燥，過濾，蒸干，的白色固體，重結(jié)晶，得芐氧羰基丙氨酰丙氨酸甲酯；將芐氧羰基丙氨酰丙氨酸甲酯溶于酒精中，加入氫氧化鈉溶液，其物質(zhì)的量為芐氧羰基丙氨酸1倍，皂化，完畢后，濃縮，乙醚洗滌，加入乙酸乙酯，調(diào)PH值至酸性，乙酸乙酯提取，水洗有機(jī)層，有機(jī)層干燥，抽濾，濃縮，芐氧羰基丙氨酰丙氨酸析出，乙醚洗滌，得到產(chǎn)品。純度98.1%，收率85%。

產(chǎn)物的定性分析：

??????質(zhì)譜：分子量?294.3??測得結(jié)果?295.20?[M+H]﹢?317.15?[M+Na]﹢??611.50?[2M+Na]﹢

??????核磁氫譜：溶劑?二甲亞砜??化學(xué)位移1.198?1.222?1.266?1.267?1.290???峰面積?6.49???化學(xué)位移?2.511峰面積?細(xì)線??化學(xué)位移?4.083峰面積?1.07??化學(xué)位移?4.199???峰面積?1.00??化學(xué)位移?5.018??峰面積?1.92??化學(xué)位移?6.028??峰面積??細(xì)線?化學(xué)位移?7.306??7.337??7.342??7.359??7.429??7.454??7.455?峰面積?5.27??化學(xué)位移?8.133??8.155??8.158?峰面積?1.02?化學(xué)位移?12.557?峰面積?0.95。

實施例2：